【摘 要】
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油性食物垃圾及含油废水是一种量大且面广的污染源。近年来,随着我国经济的快速发展,油性污染也随之增多,如何经济快速处理油性污染是解决环境问题的重中之重。目前常用的处理手段主要有物理及化学方法,但都无法彻底消除油性污染,同时处理过程极易造成二次污染。而运用生物法处理油性污染物是一种相对安全、有效及快速的方法,该方法的最终产物是H_2O和CO_2等代谢产物,不会对环境造成二次污染,因此生物处理油性污染受
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油性食物垃圾及含油废水是一种量大且面广的污染源。近年来,随着我国经济的快速发展,油性污染也随之增多,如何经济快速处理油性污染是解决环境问题的重中之重。目前常用的处理手段主要有物理及化学方法,但都无法彻底消除油性污染,同时处理过程极易造成二次污染。而运用生物法处理油性污染物是一种相对安全、有效及快速的方法,该方法的最终产物是H2O和CO2等代谢产物,不会对环境造成二次污染,因此生物处理油性污染受到越来越多科学家的关注。本研究从学校附近农贸市场进行采样,利用有效的筛选体系,成功分离到4株具有较高油脂水解活性的菌株,并命名为BB2、BB3、BB4、BB5。通过分子生物学鉴定初步判断该4株菌株为Asinibacterium lactis属。经调研,本研究是第一次将Asinibacterium lactis属的菌株用作油脂处理。对4株菌株的油脂降解性能研究表明,各菌株在72小时内的降解率均能达到80%以上;在28℃下能够达到96%以上的降解率;p H=7时各菌株降解率相对最大;菌株BB3,BB4与BB5在5%的盐浓度下的降解率高达98.47%、96.5%与96.17%;菌株BB2与BB3在5%的油浓度下的降解率高达97.26%与97.48%。为进一步增强其在各个环境下的降解水平,故将4株菌株进行混合除油实验。菌种间不相互抑制提供了可以混合使用的基础,4株菌株的混合油脂降解实验中,菌种比例正交实验确定了初步的混合配比,其结果为:BB2:BB3:BB4:BB5=3:1:2:1。复配菌剂在油脂降解实验中的结果得到了进一步的提升,为进一步增强其在各个环境下的降解水平。脂肪酶在微生物降解油脂中起到了至关重要的作用。将复配菌剂发酵液作为粗酶液,并经过一系列的纯化步骤,获得了具有一定纯度的天然微生物脂肪酶,其比活力为4199.77 U/mg蛋白,纯化倍数为19.43倍,产率为62.32%。经过SDS-PAGE电泳检验后,对比蛋白marker推算出该天然微生物脂肪酶分子量为34 k Da。纯化后的脂肪酶性质研究表明:50℃为该脂肪酶的最适温度,最适p H=7,属于一种Mn2+依赖的金属酶。同时对多种有机溶剂(除氯仿)、洗涤剂和抑制剂都展现出一定的耐受性,并且对橄榄油、菜籽油及稻米油具有良好的水解作用。以上研究结果表明,筛选出的菌株及分离纯化所得的脂肪酶具有良好的油脂降解能力,为未来不论是微生物降解油脂,亦或是脂肪酶水解油脂提供一定的理论基础,同时也为以后的油性食物垃圾及含油废水的实际大规模应用提供理论依据。
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