针刺对雌雄腹泻型肠易激综合征模型大鼠的效应差异及与性激素相关的研究

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目的:观察针刺干预腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-Predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)的效应是否具有性别差异,并探究该差异与性激素及其受体的相关性。方法:成年Sprague Dawley(SD)大鼠70只(雌雄各半)通过适应性饲养并进行基线评估剔除后,雌雄分开进行分组,各用随机数字表法分为3组:空白对照组,IBS-D模型组,针刺干预组。模型组与针刺组大鼠采用番泻叶浸液灌胃与慢性非预知温和刺激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)相结合的方式造模,造模14天。造模结束后,进行模型判定,并通过对比雌性模型大鼠与雄性模型大鼠IBS-D症状相关指标,验证IBS-D发病是否存在性别差异。然后开始针刺干预,雌雄均选取天枢、足三里、三阴交、太冲穴左右交替针刺,每天1次,每次留针20min,连续干预14天。针刺干预结束后,对比雌性模型大鼠与雄性模型大鼠IBS-D症状相关指标,包括一般情况,大鼠肠道情况以及焦虑抑郁行为表现的改善情况。并通过酶联免疫法(ELISA)检测空白、模型、针刺组大鼠外周血中性激素含量浓度,通过免疫组化方法检测空白、模型、针刺组大鼠肠道性激素受体阳性率,并进行与IBS-D症状的相关性分析。结果:1.基线期雌雄健康大鼠在进食量方面没有统计学差异(P>0.05),但雄鼠的体重明显高于雌鼠(P<0.05)。健康大鼠在内脏敏感性、腹泻程度以及情绪方面也不具有性别差异(P>0.05)。2.造模后,与空白组对比,雌雄大鼠腹泻指数均升高(P<0.05),内脏敏感性也明显升高(P<0.05),开臂时间比值(open arm time percent,OT%)与糖水偏嗜指数(sucrose preference,SP)明显降低(P<0.05),表明存在焦虑和抑郁行为。雌雄大鼠间比较发现雌性模型大鼠进食量及体重明显低于雄性大鼠(P<0.05),在腹壁撤退反射(Abdominal withdrawal reflex,AWR)实验中疼痛阈值明显低于雄性大鼠(P<0.05)。雌性模型大鼠的SP明显高于雄性模型大鼠的SP(P<0.05)。3.针刺干预后,针刺组的腹泻指数明显低于模型组,AWR阈值明显高于模型组,OT%与SP均高于模型组(P<0.05)。针刺组雌鼠进食量和体重明显高于模型组雌鼠(P<0.05)。雌雄大鼠间的比较发现虽在进食量方面已无性别差异,但雄鼠体重仍然高于雌鼠体重(P<0.05);针刺干预对雄鼠内脏敏性感的改善优于雌鼠(P<0.05),腹泻指数及焦虑抑郁行为改善方面并无性别差异(P>0.05)。4.模型组雌鼠血中雌激素(estradiol,E2)含量明显低于空白组和针刺组雌鼠(P<0.05),模型组雄鼠血中睾酮(testosterone,T)含量明显低于空白组和针刺组雄鼠(P<0.05)。模型组雌鼠肠道雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性细胞计数明显高于空白组及针刺组雌鼠(P<0.05),模型组雄鼠肠道雄激素受体(androgenReceptor,AR)阳性细胞计数明显高于空白组及针刺组雄鼠(P<0.05),且针刺组与空白组雄鼠肠道AR阳性细胞计数无统计学差异(P>0.05)。5.雌鼠血中E2浓度与内脏敏感性呈显著正相关(P<0.05),雄鼠血中T浓度与内脏敏感性也呈显著正相关(P<0.05);雌鼠肠道ER阳性细胞计数与内脏敏感性呈显著负相关(P<0.05),雄鼠肠道AR阳性细胞计数与内脏敏感性呈显著负相关(P<0.05)。结论:1.IBS-D模型大鼠在症状严重程度上存在性别差异。2.针刺对IBS-D模型大鼠的干预效应较为确切,且在对内脏敏感性的改善方面具有性别差异,雄性优于雌性。3.IBS-D病症的性别差异与性激素及其受体关系密切,且针刺效应的性别差异与性激素及其受体也具有相关性。
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