本文对吉林省主栽水稻品种进行了组织培养特性的优化研究；应用基因枪法将抗BASTA除草剂基因(bar)和抗稻瘟病基因(植物抗毒素反二苯乙烯合成酶)转入吉林省主栽的高产、优质水稻品种中，获得了转基因水稻植株；对转抗稻瘟病基因水稻植株进行了抗稻瘟病性鉴定和遗传学分析，研究结果如下： 一、优化了吉林省主栽水稻品种(系)成熟种子胚的组织培养体系 1．不同品种(基因型)的愈伤组织诱导频率和分化频率差别很大，吉89-45、超产2号、丰优501和丰优307四个基因型的愈伤组织诱导频率分别为86.4％、88.7％、80.8％和81.6％；吉89-45、超产2号和丰优501分化率分别达到50.1％、45.8％和49.5％。 2．继代培养基中减少2，4二氯苯氧乙酸(2.4-D)用量到1.0mg/L，添加萘乙酸(NAA)1mg/L和激动素(KT)0.5mg/L可以改善水稻愈伤组织的生长状态。圆型，色泽浅黄，质地紧密，分散性好的胚性愈伤组织数量增多，提高了水稻愈伤组织的分化能力。 3．分化前干燥处理16小时，可以使水稻愈伤组织的分化率提高20.6％-37.2％。处理时间达到36小时后，愈伤组织的分化能力反而下降。 二、应用Gus基因(β-glucuronidase)的瞬间表达研究，优化了PDS-1000型基因枪转化吉林省主栽粳稻品种(Japonica)成熟胚来源愈伤组织的各种参数 1．在DNA－金弹与受体靶细胞距离为9厘米，轰击2次时，转化效率最高，GUS基因的瞬间表效率达到88．2％；当轰击距离为6厘米时，瞬间表达效率有所提高，但金粉对靶细胞产生破坏作用，转化效率降低；轰击距离为12厘米时转化效率降低； 2．轰击距离相同，随着轰击次数的增多，GS S基因的瞬间表达效率提高。轰击距离为9厘米时，轰击1、2、37！K时，GuS基因的瞬间表达效率分别为 30．60％、88．25％和 90．04％。三、获得了抗BASTA除草剂的转基因水稻植株 以水稻成熟胚来源的胚性愈伤组织为受体，应用基因枪法将质粒0Dm03 含报告基因Gus和抗除草剂基因bar）转入北方早熟栽培粳稻品种吉89－45中，获得了转基因水稻植株。经转基因植株叶片的除草剂淙布试验表明，D；，－l，D。－2，D。－3三个转基囚植株水稻叶片颜色没有变化，仍为绿色，表现对3ASTA除草剂的抗性，证明外源基囚在转基因叶片中表达，使水稻叶片产生对BA盯A除草剂抗性。经pCR和Southe，n杂交检测，证明抗除草剂基回己整合到水稻基因组中cD。－5转基因植株中检测到429加的ba，基因目标带，但对除草剂敏感，外源基因在D。－5植株中产生基因沉默现象。四、获得了转抗稻瘟病基因的转基因水稻植株 应用基因枪法将抗稻瘟病基因转入吉林省主栽的高产、优质、稻瘟病抗性弱的水稻品种超产2号和丰优201中。经PCR检测，转基因植株中存在抗稻瘟病基因的目标带。五、对转抗稻瘟病基因水稻进行了抗病性和遗传学分析 1．应用稻瘟病抱子对转抗稻瘟病基因水稻植株进行接种鉴定和PCR检测技术，分析了抗稻瘟病基因在T；代和T。代转基因水稻中的遗传特性和抗病性。研究表明，抗稻瘟性基因可以提高转基因水稻的稻 互且瘟病抗性，外源基因可以通过有性世代遗传给下一代。抗稻瘟病基因在T；代和L代未纯合的转基因水稻中呈3：1的盂得尔方式分离。获得了抗稻瘟病性好，外源基因纯合的转基因水稻株系。 2．T；代转基因水稻植株农艺性状调查表明，基因枪法获得的转基因后代产生大量变异。株高，分菜性，穗粒数，出穗日期和育性都产生变异。六、应用基因工程技术将抗水稻纹枯病基因（X821）连接到载体 （扯川阻A 1201）中