甲拌磷降解菌的筛选及其降解特性研究

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甲拌磷在有机磷杀虫剂毒性排名第一。甲拌磷及其代谢物形成的更毒的氧化物在植物体内至少能保持1-2个月;在土壤中残留期超过50天。使用不当或长期连续使用会对人体和环境造成较大的危害。我国已禁止其在蔬菜、水果、中草药上使用,目前主要用于玉米播种时期的土壤处理、防治地下害虫和苗期蚜虫等或制成混剂使用。本研究从长期受甲拌磷污染的土壤中筛选分离到一株甲拌磷高效降解菌JZ1,鉴定该菌为剑菌属微生物(Ensifer sp.)。其在牛肉膏蛋白胨液体培养基中4h后进入对数生长期,24h进入稳定期。该菌能在pH5.0-9.0范围内地生长良好,最适pH为8.0;最适生长温度为37℃;最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和酵母膏;最佳NaCl质量浓度为0.5%,超过8.0%时生长明显受到抑制。针对JZ1在实验过程中出现菌种衰退的现象,采用了土壤浸出液复壮法恢复了其生长繁殖能力,且生物学特性保持不变。JZ1能耐受甲拌磷浓度高达28000mg/L。筛选初期24h时对200mg/L的甲拌磷降解率为42.2%;驯化浓度达到800mg/L后,降解率达到56.3%;简易化的化学诱变和紫外诱变处理后,降解率分别提高至67.8%和83.2%。气相色谱法测定甲拌磷的降解动态,12h-24h内下降迅速,24h后降解率为83.99%,此后基本维持在此水平。Ensifer sp微生物对甲拌磷具有如此高的耐受性并具有降解性能尚属首次报道。甲拌磷的有效成分为O,O-二乙基-S-乙硫基甲基二硫代磷酸酯,根据甲拌磷被生物降解时易断裂的键位,推测甲拌磷的降解过程为:O,O-二乙基-S-乙硫基甲基二硫代磷酸酯首先降解为二乙基磷酸,继而转变为磷酸。微生物降解过程中,推测一部分磷元素被微生物吸附或被用来合成菌体组成物质。筛选初期,JZ1细胞形态为短杆状,驯化后转变成球形,继代培养1代至15代始终保持球形,其它各项生物学指标和降解性能均与初始菌株一致,表明该菌株具有良好的传代稳定性。
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