竹叶黄酮的酶促酰化和抗氧化研究

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竹叶黄酮是我国近年开发的具有本土资源特色的食品抗氧化剂。研究表明,竹叶黄酮具有优良的抗氧化、抗突变和保护心脑血管等多种生理活性。本文以竹叶黄酮为研究对象,主要研究内容和结果如下:(1)通过高效液相色谱法(HPLC)对市售竹叶黄酮进行分离:色谱柱为Synthesis C18(250mm×4.6mm,5um),确定竹叶黄酮主要为四种碳苷黄酮:牡荆苷、荭草苷、异牡荆苷、异荭草苷。外标法定量,四种竹叶黄酮的含量分别为:异荭草苷58.51%,荭草苷16.79%,牡荆苷4.34%,异牡荆苷18.36%;即四种黄酮苷的含量异荭草苷>异牡荆苷>荭草苷>牡荆苷。(2)选定固定化脂肪酶B(Novozmy 435)作为生物酶催化剂,以不同饱和度的十八碳脂肪酸(C18:0、C18:1、C18:2)为酰基供体对竹叶黄酮进行酰化修饰。最终分离纯化后各得到异牡荆苷和异荭草苷的两种酰化衍生物,采用IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等方法对其进行了结构鉴定,确定酰化位点位于异牡荆苷和异荭草苷糖基配基的6″位。同时,测定并比较了酰化产物的正辛醇/水体系分配系数,结果表明酰化产物亲脂性明显提高。(3)本文对竹叶黄酮酰化衍生物异牡荆苷-6″-油酸酯和异荭草苷-6″-油酸酯的体外抗氧化活性进行了初步研究。探究了酰化衍生物的还原能力和在葵花籽油中的抗氧化性,同时研究了酰化产物对DPPH自由基体系、H2O2/Fe2+产生的羟基自由基体系的体外清除自由基能力。结果表明:酰化产物与标准品异牡荆苷和异荭草苷相比在葵花籽油中的氧化诱导时间延长,还原能力、清除DPPH自由基和羟基自由基的能力在实验测试范围内均有下降。(4)运用相转移催化法合成二碳酸二甲酯(DMDC),通过薄膜蒸发器对产品进行纯化,产品经化学电位法滴定,纯度为98%(卫生部公告2011年第19号,DMDC,99.8%),需进一步优化纯化工艺。
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