额尔齐斯河双身虫分类、种群生态及分子系统学研究

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双身虫(Diplozoid)是鱼类寄生虫,在全世界分布广泛,其隶属于扁形动物门(Playthelminthes)、单殖吸虫亚纲(Monogenea)、铗钩虫目(Mazocraeidea)、双身虫科(Diplozoidae)。本文利用传统的寄生虫鉴定方法、常规的鱼类寄生虫流行病学调查方法、生物统计学方法及现代分子生物学技术,对额尔齐斯河鱼类双身虫的分类、种群生态及系统发育进行了研究,主要结果如下:(1)通过野外调查,在额尔齐斯河采集并经形态鉴定得到5种鱼类双身虫,分别为奇异双身虫(Diplozoon paradoxum Nordmann,1832)、西伯利亚拟双身虫(Paradiplozoon homoion Bychowsky et Nagibina,1959)、鮈拟双身虫(Paradiplozoon gracile Reichenbach Klinke,1961)、斯氏拟双身虫(Paradiplozoon skrjabini(Achmerov,1974)Khotenovsky,1985)、日本真双身虫(Eudiplozoon nipponicum(Goto,1891)Khotenovsky,1985),其中双身虫属的奇异双身虫为我国的新纪录属、种,西伯利亚拟双身虫及鮈拟双身虫为我国的新纪录种。本文对5种双身虫绘制了特征图片并进行了描述。(2)本次实验共检查东方欧鳊373尾、鲤鱼173尾、贝加尔雅罗鱼209尾、湖拟鲤234尾、尖鳍鮈140尾,统计结果表明,在5种鱼体采集得到的5种双身虫的平均感染率及平均感染强度分别为:奇异双身虫28.69%、5.46;日本真双身虫1.73%、2.33;斯氏拟双身虫4.78%、1.6;西伯利亚拟双身虫3.42%、1.75;鮈拟双身虫27.14%、4.21。东方欧鳊感染奇异双身虫的情况最严重,尖鳍鮈感染鮈拟双身虫的情况仅次之,其余3种鱼的感染情况相似,感染程度较轻。将5种宿主鱼分别按体长分段,研究宿主体长与双身虫感染的关系,发现在较大体长段的宿主鱼上会有较多的双身虫寄生。(3)通过在额尔齐斯河野外取样调查,研究寄生于东方欧鳊鳃部的奇异双身虫的种群生态学特点。结果表明,东方欧鳊感染奇异双身虫的总感染率为24.16%,平均感染强度为4.19,在宿主体长L≤30cm时,感染率随体长增大有升高的趋势;在体长25cm<L≤30cm时,感染率达到最大,为42.11%;而体长大于30cm的宿主,没有感染奇异双身虫。奇异双身虫在东方欧鳊各体长段均呈聚集分布。(4)利用分子生物学技术,使用真核生物通用引物扩增采集到的双身虫的ITS-2 rDNA序列,测序并将得到的序列上传GenBank,获得基因登录号(KP326299、KP340972~KP340975),利用ITS-2rDNA基因序列构建双身虫的进化树,奇异双身虫及日本真双身虫分别与其他地域发现的该虫种聚为一支。鮈拟双身虫、西伯利亚拟双身虫及斯氏拟双身虫通过ITS-2序列测序比对,发现三者遗传同源性极高,但在形态上各具特点。
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