论文部分内容阅读
目的:将小青龙汤进行剂型改革,研制成能黏贴于皮肤上,用于治疗支气管炎的外用膏贴制剂。进行小青龙膏贴的提取工艺、制剂成型工艺、制剂质量标准、释放度、离体透皮试验、影响因素试验等研究,为研制小青龙膏贴新药奠定基础。方法:1.提取工艺研究:①采用L9（34）正交表,以浸膏得率、麻黄碱和芍药苷的提取量为考察指标,以高效液相色谱法测定麻黄碱和芍药苷的含量,优选并比较处方中麻黄、白芍、半夏、五味子、甘草五味药材的乙醇回流和乙醇渗漉两种提取工艺。选择乙醇浓度、乙醇用量（ml/g）、提取时间（h）/提取次数作为影响因素,优选乙醇回流提取工艺;选择乙醇浓度、渗漉速度(ml·min-1·kg-1)、浸泡时间、乙醇用量（ml/g）作为影响因素,优选乙醇渗漉提取工艺。②采用L9（34）正交表,用水蒸气蒸馏法提取挥发油,以挥发油提取量为考察指标,以加水量、浸泡时间和提取时间作为影响因素,优选处方中干姜、桂枝、细辛三味药材的挥发油提取工艺。2.制剂成型工艺研究:在预试验的基础上,测定膏贴成品的黏附力,并结合膏贴的感官,如平整性、均匀度、软硬度、皮肤残留、渗透性等方面进行综合评分作为考察指标,采用L16（45）正交试验优选小青龙膏贴的基质配比;以巴布剂样品的黏着性和各项感官为考察指标,采用L16（45）正交试验优选小青龙巴布剂的基质配比。3.制剂质量标准研究:采用薄层色谱法对小青龙膏贴中麻黄、白芍、桂枝、干姜、细辛、甘草、五味子进行定性鉴别;采用薄层色谱法对细辛中马兜铃酸进行限量检测;采用HPLC法测定小青龙膏贴中盐酸麻黄碱的含量,色谱条件:采用Agilent TC-C18色谱柱（4.6×250mm,5μm）;流动相:甲醇-0.1%磷酸（10:90）;流速:1.0ml·min-1;检测波长:207nm;柱温:30℃。采用HPLC法测定小青龙膏贴中芍药苷的含量,色谱条件:采用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相:甲醇-水（23:77）;流速:1.0ml·min-1;检测波长:230nm;柱温:35℃;对制剂的含膏量、黏着力、赋型性、重量差异进行检查。4.释放度及离体透皮率研究:采用释放度装置及智能透皮试验仪进行制剂的释放度及离体透皮吸收试验,用HPLC法测定接受液中盐酸麻黄碱的含量,计算小青龙膏贴、小青龙巴布剂中盐酸麻黄碱的释放度和离体透皮率,对两种剂型的小青龙外用制剂的释放度与离体透皮率进行比较。5.制剂稳定性影响因素试验:将小青龙膏贴制剂置于恒温恒湿箱中,40℃条件下放置10天,以制剂的性状、鉴别、含膏量、黏附力、盐酸麻黄碱含量为考察项目,进行高温试验。将小青龙膏贴放置于装有KNO3饱和溶液（25℃,RH92.5%）的密闭容器中10天,以制剂的性状、鉴别、含膏量、黏附力、吸湿增重、盐酸麻黄碱含量为考察项目,进行高湿试验。结果:1.提取工艺研究:①优选乙醇渗漉提取工艺为:用10倍量的55%乙醇浸泡12小时、以3ml·min-1·kg-1速度渗漉提取;优选乙醇回流提取工艺为:用8倍量的70%乙醇提取3次,第一次提2小时,第二次提1小时,第三次提1小时。乙醇渗漉提取工艺优于乙醇回流提取工艺。②优选挥发油提取工艺为:用12倍量的水浸泡1小时,然后用蒸馏法提取6小时。2.优选的小青龙膏贴制剂成型工艺为:石蜡2份,单甘酯0.9份,微晶纤维素0.4份,明胶0.5份,1%聚丙烯酸钠0.6份,甘油0.2份,月桂基硫酸钠0.02份,浸膏1份,熔融搅拌法制备。优选的巴布剂基质组方配比为:明胶:PAA（S）（70%）:PVP K-30:甘油:PEG-400=4:2:4:2:1。3.质量标准研究:制剂中麻黄、白芍、桂枝、干姜、细辛、甘草、五味子的薄层鉴别图谱清晰,方法简便;马兜铃酸A限量检测:发现小青龙膏贴和细辛药材中均未见马兜铃酸A相同斑点,此方法对马兜铃酸A的最小检测限为0.031μg;制剂中盐酸麻黄碱含量测定:线性范围为0.0404μg～0.404μg（r=0.9999）;精密度试验:RSD=1.16%;重复性试验:盐酸麻黄碱平均含量0.09663%,RSD=1.79%;回收率试验:平均加样回收率为100.21%,RSD=1.82%。制剂中芍药苷含量测定:线性范围为0.1005μg～1.005μg（r=0.9999）;精密度试验:RSD=0.995%;重复性试验:芍药苷平均含量0.152%,RSD=1.65%;回收率试验:平均加样回收率为99.45%,RSD=1.87%。制剂的含膏量、黏着力、赋型性、重量差异等项目检查符合规定。4.释放度及离体透皮率研究:小青龙膏贴中,盐酸麻黄碱在水中150min的释放度为55.14%,48h的累计离体（小鼠）透皮吸收率为30.30%;小青龙巴布剂中,盐酸麻黄碱在水中150min的释放度为85.61%,48h的累计离体（小鼠）透皮吸收率为28.48%。5.影响因素稳定性研究结果表明:样品在40℃下基本稳定,各项检测指标未见明显变化,在高湿条件下必须密封包装,才能保证质量稳定。结论:研制的小青龙膏贴具有较好的皮肤黏贴性、释放性与皮肤渗透性。通过提取工艺、制剂成型工艺、制剂质量标准及影响因素稳定性试验研究,为小青龙膏贴新药研制奠定了良好的基础。