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第一部分 大鼠种植型肝癌模型的建立;研究目的:分别采用直接注射法和瘤块嵌插法制作大鼠Walker-256种植型肝癌动物模型,观察种植型肝癌的影像学、病理学特征,比较两种方法的接种阳性率、肿块大小、生长速度、肝临近脏器浸润转移情况.材料和方法:冻存的Walker-256瘤株复苏.SD雄性成年大鼠40只,体重200±20g;随机分两组.直接注射法是将经过离心浓缩的微量癌性腹水直接注入大鼠肝脏,瘤块嵌插法采用微小瘤组织块嵌入大鼠肝脏包膜下种植肿瘤.1周后,两组大鼠均行CT平扫、增强扫描及MRI扫描,观察肿瘤的大小、密度、信号、边缘等.病理大体及HE染色后光镜下观察其病理学特征.根据影像学、病理学结果比较两种方法的接种阳性率、肿块大小、生长速度、肝临近脏器浸润转移情况.结论:大鼠Walker-256种植型肝癌在肝内呈膨胀性和浸润性生长,其影像学表现与人原发性肝癌相似,适宜于肝癌介入治疗的实验研究.直接注射法与瘤块嵌插法比较具有以下优点:1、成瘤时间短,大大缩短了实验周期.2、制作方法更简易.但直接注射法由于采用癌性腹水直接注射,存在沿针道返流可能性,邻近脏器浸润机会增多.第二部分 大鼠种植型肝癌电化学疗效评价的实验研究;研究目的:采用电化学疗法治疗大鼠处植型肝癌,通过大鼠种植型肝癌电化学疗法治疗前后影像学、病理组织学、细胞凋亡、细胞免疫功能改变、系列细胞因子(IL-2、sIL-2R、IL-6、TNF-α)表达水平变化、生存期的观察比较,全面而合理地评价电化学疗法对大鼠种植型肝癌的疗效,为临床相关研究工作的开展奠定基础.材料和方法:Walker-256种植型肝癌大鼠50只,随机分两组:电化学治疗组35只,荷瘤对照组15只,另取同样大小正常大鼠10只做空白对照组.电化学治疗组大鼠无菌状态下开腹,暴露出荷瘤肝叶,直视下将铂金电极针平行插入肝肿瘤中,深度要穿通肿瘤,阳极位于瘤体中心,周边按等边三角形分布各插入三根阴极电针,阴阳极电针相距约3~4mm,接通电化学治疗仪,控制电压为6~8V,电流10~20mA,治疗时间约10min,总电量约30库仑.大鼠种植型肝癌电化学疗法治疗后1、2周,分别行CT、MRI扫描,观察肿瘤大小、密度、信号、边缘等影像学特征变化.大鼠种植型肝癌电化学疗法治疗后1周,治疗组和荷瘤对照组各将处死5只大鼠,切取肿瘤行病理学检查,HE染色和甲基绿派洛宁G和马体黄S组合染色(MG-P-MY组合染色)观察肝肿瘤的坏死及细胞凋亡情况,并计算细胞凋亡指数.大鼠种植型肝癌电化学疗法治疗后1、2周,治疗组大鼠和荷瘤、空白对照组大鼠一起,分别从眼眶采血,行流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8).电化学疗法治疗组和对照组大鼠于治疗后1、2周,分别采用外周血进行IL-2、sIL-2R、IL-6、TNF-α水平检测,并与空白对照组大鼠进行比较.电化学治疗后,治疗组大鼠和荷瘤对照组大鼠各取10只,不再给予任何干预,在相同情况下,观察它们的生存时间,并进行生存期的比较.结论:大鼠种植型肝癌肿瘤负荷导致细胞免疫功能和细胞因子表达紊乱.电化学治疗促进肿瘤坏死,诱发肿瘤细胞凋亡,可明显抑制肿瘤生长,改善和纠正机体免疫紊乱,增强大鼠免疫力,延长大鼠生存期.电化学疗法是一种有效的肝癌非手术治疗方法.