CTAB反胶束萃取大蒜粉中蒜氨酸的研究

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大蒜是一种百合科葱属植物,数千年来一直被药食两用,随着人们对大蒜药用保健价值的深入研究及应用,大蒜越来越受到人们的关注与青睐。蒜氨酸是大蒜中的一种风味前体生物活性分子,具有抗菌、杀病毒、清除自由基作用,此外对人体免疫系统、血液循环系统、肿瘤血管疾病、衰老机制和血脂血压有明显功效作用。大蒜素是细胞中的蒜氨酸酶和蒜氨酸反应的风味物质,当大蒜细胞的细胞膜在物理化学因素作用下破裂的时候,液泡内的蒜氨酸酶就会催化蒜氨酸发生反应生成大蒜素这种物质,大蒜素也具有抗菌、抗肿瘤等活性,但是不稳定,常温下易发生降解而失去本身具有的活性,本文研究了利用CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)反胶束体系萃取蒜氨酸的工艺条件,并对工艺条件进行优化,主要内容如下:(1)通过对液相色谱条件的逐一摸索,得出适宜反胶束提取大蒜粉中蒜氨酸的测定方法。即色谱柱:Ufavour ODS-C18(4.6×250 mm,5μm),检测波长:210nm,流动相:10%甲醇和90%水,流速:0.3 mL/min(0-15 min),进样量:20μL,柱温:35℃。在以上色谱条件下,10.918 min附近出现的峰就可以认定为蒜氨酸的峰,并且分离度均大于1.0,说明蒜氨酸和其他物质分离程度良好,蒜氨酸分离较好。同时,利用所探索液相色谱条件,对蒜氨酸标准品进行梯度测定,绘制得到蒜氨酸标准曲线。(2)优化CTAB/正辛醇/正庚烷混合体系提取蒜氨酸条件,分别考察和衡量了萃取时间、CTAB浓度、温度、KCl浓度、缓冲溶液pH值、蒜粉加入量等因素对蒜氨酸提取效果的影响,先通过单因素实验,在已有的数据基础上,再通过正交实验得到萃取蒜氨酸的最优的工艺条件,找到萃取率最高最好的组合条件。在正交实验得到的数据的基础上,得到用CTAB/正辛醇/正庚烷反胶团体系提取蒜氨酸的得率最高的条件为反胶团体系中CTAB浓度为0.07 mol/L,缓冲溶液pH 7.0,KCl浓度0.3 mol/L,萃取时间30 min。最佳前萃率为1.62%。(3)通过改变不同的反萃取水相的条件包括反萃取水相的离子浓度、反萃取水相的pH值、以及水相和有机相的相比等条件考察不同条件对蒜氨酸反萃取率的影响。在正交实验得到的数据的基础上,得出蒜氨酸提取率最高的反萃取条件为反萃取水相中溶液pH为5.0,KI浓度0.8 mol/L,有机相与水相的相比为1:3。最佳反萃率为1.26%。在以上各个因素下选择的不同水平,得出不同因素对蒜氨酸提取率的影响效果大小顺序为:离子浓度>有机相与水相相比>反萃溶液pH值。
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