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天麻是传统名贵中药材，具有镇静、抗惊厥、抗炎镇痛、抗衰老、提高免疫功能等作用，另外还含有具有广泛应用前景的抗真菌蛋白。川牛膝为著名川产地道药材，药用历史悠久，药效广泛，现代药理学实验证明它具有抗肿瘤、免疫调节等作用，具有较好的药用前景，而成为新的免疫调节药物。四川是天麻、川牛膝的地道产区。本研究对采自主产区的不同野生和栽培系的天麻、川牛膝进行RAPD、AFLP分析，主要结果如下： 1通过对7组140条RAPD引物的筛选，筛选出OPB，OPI，OPN，OPW等4组中的15条对天麻具有多态性扩增且重复性好的引物，共扩增出92条清晰可辨的条带，其中87条多态性条带，24条特异性条带；多态性条带率达和特异性条带率分别达93.5％和25％，24条特异性条带可区分出除T1，T3，T9外，10个样品中的7个；24条特异性条带中，密环菌的特异性条带最多，达13条，其次是T8，有3条。随机引物OPB-5扩增出的特异性条带最多，有4条，特异性条带率达57.2％，可以鉴定出M和T8两个样品；随机引物OPN-10扩增出的9条带中，有3条特异性的带，可区分M，T8，T2三个样品。NTSYS软件聚类结果表明：采自同一地方(广元青川)不同地点的T5，T6具有最近的亲缘关系，其遗传相似系数达0.81；密环菌M与其它9种野生与栽培系的天麻的遗传距离最远，其遗传相似系数只有0.37。从总体上看，采自高庄林场的n，T2，T3，T4和老河沟采育场的T5，T6，T7及采自雅安地区的T9，T8可以聚为两大类，说明由于地理分布和海拔高度的不同，天麻种内的DNA存在较大的变异性。 2 通过对同一株不同生长时期的天麻与蜜环菌的RAPD扩增结果的研究表明：同一株天麻不同生长时期的DNA不表现差异，而且与密环菌没有共同的条带，这说明密环菌与天麻的DNA有较大的差异，特别是与块茎之间的差异说明密环菌的遗传物质在天麻的生长过程中侵入天麻块茎皮层以内的部位时已被同化。 3 通过对145对E／M引物组合，92对M／P引物组合，72对E／P引物组合进行筛选，仅在E／P引物组合中寻找出6组对天麻具多态性扩增且重复性好的引物，与其它植物中用E／M或E／P组合进行扩增不一致，说明采用AFLP技术对天麻等中药材进行研究，其 引物组合与其它植物类材料研究相比有较大的差异。6个引物组合共扩增出300条清晰 可辨的条带，其中289条多态性条带，50条特异性条带；多态性条带率和特异性条带率 分别达98．0％和16．6％，SO条特异性条带可区分出全部m个供试材料；引物组合P4V阮6 所产生的特异性条带最多，达 13条，可以鉴别出 M，TI，TZ，T6，Tg等 5个样品；引 物组合P53／E44所产生的多态性条带可以区分出的样品数最多，7条特异性的条带可以 区分出M，TI，T4，TS，T6，TS等6个蜜环菌及天麻的野生品系和栽培品系；50条特异 性条带中，密环菌M具有最多的特异性条带，达18条；其次是Tg和TI，分别有9条和 7条。聚类结果表明：密环菌M与天麻各栽培系及野生系的亲缘关系最远，它们之间的 遗传相似系数只有0．42，其次是野生天麻TI与其它系天麻的相似系数为0．546；而采 自同一地方的 T3和 T4具有最近的亲缘关系，其遗传相似系数达 0．78，总体来看地域对 天麻种内多态性有一定的影响，但不如 RAPD聚类结果那么明显，野生品系与栽培品系 间的差异比较显著。 4从 7组 140条 RAPD引物中筛选出分布于 OPB，OPL，OPN，OPU，OPW等 5个 引物组中的30条对）！I牛膝具有多态性扩增且重复性好的引物，共扩增出232条清晰可 辨的条带，其中183条为多态性条带，52条为特异性条带；多态性条带率达和特异性条 带率分别达 79．2％和 22．5％；52条特异性条带可区分出所有要分析的 6个牛膝样品；引 物OPW－17的特异性条带率最高，达85．7％，6条特异性条带可区分出NI，NZ，N3，N4 四个川牛膝品系，可区分出的品系数目也是所有引物中最多的；在52条异性条带中， NZ的特异性条带最多，达22条，其次是N3，共有13条。聚类结果表明：NS，N6具有 最近的亲缘关系，它们之问的遗传相似系数为0．83，杂交牛膝NZ与其它采自各地的牛 膝品种之间的遗传差异最大，其相似系数只有 0．51。川牛膝的 DNA样性与地域和品系差 异有关。 5通过对145对E／M引物组合，92对M／P引物组合，72对E／P物组合进行筛选，寻找出 9组对川牛膝具有多态性扩增且重复性好的引物组合，同时发现，在川牛膝中仍然是E／P 引物组合扩增出多态性，M／P组合只有一个。9个引物组合共扩增出445条清晰可辨的条 带，其中413条多态性条带，83条特异性条带；多态性条带率达和特异性条带率分别达 294．4％和m．7％，可以区分出全部7个牛膝品系；引物组合陀VE66扩增出的特异性条带及其可鉴别的样品数皆最多，共扩增出特异条带18条，可区分出?