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目的检测C-X-C家族趋化因子14(C-X-C chemokine ligand-14,CXCL14)和表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)的蛋白和m RNA在胃癌和非胃癌胃粘膜组织(包括自体和异体非胃癌胃黏膜)中的表达,探讨CXCL14、EGFR在胃癌发生发展中的作用及两种分子间的相关性,为进一步深入研究CXCL14在胃癌及其它恶性肿瘤中的作用提供思路和参考依据,并为胃癌早期发现、判断预后及寻找可能的分子治疗靶点提供实验依据。方法1、标本收集:收集本院2015年至2016年手术切除的胃癌标本121例(因胃癌组织学类型主要为腺癌,所以本实验纳入的所有胃癌标本均为胃腺癌,论文中均以胃癌表述)、自体非胃癌胃黏膜标本62例及异体非胃癌胃黏膜标本60例,经石蜡切片、苏木素-伊红染色(HE)进一步明确诊断,并进行免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色。另在收集上述用于HE、IHC染色标本的同时,留取胃癌手术切除的新鲜标本,包括胃癌和自体非胃癌胃黏膜标本各41例,即刻装入标记好的冻存管中存于-176℃液氮中,以用于m RNA检测。所有标本对应的患者手术前均未行化疗、放疗及免疫治疗等。本实验研究经本院伦理委员会批准。2、实验方法:采用免疫组织化学SP法检测121例胃癌组织、62例自体非胃癌胃粘膜组织及60例异体非胃癌胃粘膜组织中CXCL14和EGFR的蛋白的表达情况,采用实时定量RT-PCR技术检测41例胃癌和41例自体非胃癌胃粘膜组织中CXCL14和EGFR的m RNA的相对表达量。3、统计学处理:应用软件SPSS17.0对上述各组实验数据进行统计学分析,计量资料以均值(means)±标准差(SD)形式表示并采用配对t检验进行分析,计数资料采用χ2检验进行分析,相关性分析采用Spearman法进行分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果1、CXCL14的表达情况:CXCL14的蛋白在胃癌组、自体非胃癌胃黏膜组及异体非胃癌胃黏膜组中的阳性表达率依次为80.17%、61.29%、51.67%,三组间比较差异有统计学意义(P<0.01);两两组间比较,胃癌组中CXCL14的蛋白的表达分别高于自体非胃癌胃黏膜组和异体非胃癌胃黏膜组,差异有统计学意义(P均<0.01),自体非胃癌胃黏膜组和异体非胃癌胃黏膜组两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CXCL14的蛋白的表达与胃癌组织浸润深度、组织分化程度和临床TNM分期有关(P均<0.05),即胃癌组织浸润至浆膜组中CXCL14的蛋白的表达高于未浸润至浆膜组,差异有统计学意义(P<0.05);低分化胃癌组高于高-中分化组,差异有统计学意义(P<0.05),临床TNM分期Ⅲ+Ⅳ期组高于Ⅰ+Ⅱ期组,差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL14的m RNA在胃癌组和自体非胃癌胃黏膜组中的相对表达量分别为2.821±0.229、1.000±0.000,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。CXCL14的m RNA的相对表达量与胃癌组织浸润深度、组织分化程度和临床TNM分期有关(P均<0.05),即CXCL14的m RNA在胃癌组织浸润至浆膜组中的相对表达量(3.161±0.211)明显高于未浸润至浆膜组(2.450±0.222),差异有统计学意义(P<0.05);低分化组(3.214±0.157)明显高于高-中分化组(2.062±0.273),差异有统计学意义(P<0.001);临床TNM分期Ⅲ+Ⅳ组(3.170±0.218)明显高于Ⅰ+Ⅱ组(2.503±0.217),差异有统计学意义(P<0.05)。2、EGFR的表达情况:EGFR的蛋白在胃癌组、自体非胃癌胃黏膜组及异体非胃癌胃黏膜组中的阳性表达率依次为48.76%、30.64%、21.67%,三组间比较差异有统计学意义(P<0.01);两两组间比较,胃癌组中EGFR的蛋白的表达分别高于自体非胃癌胃黏膜组及异体非胃癌胃黏膜组,差异有统计学意义(P均<0.01),自体非胃癌胃黏膜组与异体非胃癌胃黏膜组两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR的蛋白的表达与胃癌组织分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期有关(P均<0.05),即低分化胃癌组中EGFR的蛋白的表达明显高于高-中分化组,差异有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.05);临床TNM分期Ⅲ+Ⅳ期显著高于Ⅰ+Ⅱ期组,差异有统计学意义(P<0.01)。EGFR的m RNA在胃癌组和自体非胃癌胃黏膜组中的相对表达量分别为2.117±0.750、1.000±0.000,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。EGFR的m RNA的相对表达量与胃癌组织分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期有关(P均<0.05),即低分化组中EGFR的m RNA的相对表达量(2.483±0.133)明显高于高-中分化组(1.588±0.133),差异有统计学意义(P<0.001);有淋巴结转移组(2.352±0.153)高于无淋巴结转移组(1.875±0.166),差异有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅲ+Ⅳ组(2.453±0.179)明显高于Ⅰ+Ⅱ组(1.914±0.138),差异有统计学意义(P<0.05)。3、CXCL14和EGFR表达的相关性分析:经Spearman相关分析得出,胃癌组织中CXCL14的蛋白的表达与EGFR的蛋白的表达呈正相关(r=0.195,P<0.05),胃癌组织中CXCL14的m RNA的相对表达量与EGFR的m RNA的相对表达量呈正相关(r=0.408,P<0.01)。结论1、胃癌组织中CXCL14的蛋白和m RNA的表达均高于非胃癌胃粘膜组织,且CXCL14的表达情况与胃癌组织浸润深度、组织分化程度和临床TNM分期有关,提示CXCL14可能是胃癌发生和进展的早期分子事件,CXCL14的高表达可能和胃癌的发生发展、预后不良有关。2、胃癌组织中EGFR的蛋白和m RNA的表达均高于非胃癌胃粘膜组织,且EGFR的表达情况与胃癌组织分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期有关,提示EGFR可能与胃癌的发生发展、预后不良有关。3、胃癌组织中CXCL14和EGFR的蛋白、m RNA的表达均呈正相关,提示两种分子在胃癌发生发展中有一定的协同作用,联合检测CXCL14、EGFR可能对胃癌早期诊断、判断预后更有参考意义。