前言 子宫内膜异位症(endometriosis，EM)是一种常见的妇科疾病，约有10％生育年龄的妇女患有此症，其发病机理尚未完全阐明。尽管经血逆流的理论为大多数学者所接受，但经血逆流理论不能解释90％的妇女可以发生经血逆流却仅有少数妇女发生EM的现象。随着免疫学的飞速发展，免疫因素在EM发生、发展中的作用越来越受到重视。研究表明，EM患者免疫异常对异位内膜的种植、粘附、增生具有直接或间接作用。瘦素(leptin，LP)，作为前炎性因子，可促进辅助性T细胞1(helper T cell，Th1)的产生，增强细胞介导的免疫及炎症反应，导致免疫异常；并且LP作为促血管生成因子，可促进新生血管的形成。本研究应用放射免疫技术检测了EM患者腹腔液(peritoneal fluid，PF)中LP的水平，分析LP的免疫学作用及血管生成作用，探讨其与EM发病机理的关系。 实验材料 一、标本来源： 实验组：EM患者PF标本32例，来源于2001年6月至2002年1月期间在中国医科大学第二临床学院妇科病房所收治的EM患者。诊断按第五版全国通用妇产科学教材所规定的EM诊断标准；分期采用修订的美国生殖学会EM分期法(r-AFS)，其中早期(Ⅰ～Ⅱ期)病例14例，晚期(Ⅲ～Ⅳ期)病例18例。按病灶类型划分，其中红色病变10例，其他类型病变22例。按是否合并不孕划分，其中合并不孕者11例，无合并不孕者21例。所有EM患者均进行了痛经评分，具体方法，口分：无痛经；豆分：有痛经，不需服药，不影响日常生活和工作；2分：痛经需用药物缓解，对日常生活及工作有影响；3分：痛经需服药治疗，影响日常生活，不能进行工作。年龄26－47岁，平均年龄35．3。5．4岁，身高体重指数（body－mass index，BMI）20．0－24．8，平均 22．6 t 2．0。 对照组：来源于同期在中国医科大学第二临床学院妇科因输卵管结扎后行输卵管再通术者5例、鞍山市计划生育服务中心行输卵管结扎术者7例，共12例。年龄32－43岁，平均37．3 L 3．1岁。BMIZI．4－24．7，平均22．9of．2。 所有患者均无代谢性疾病、结缔组织病、急性炎症等疾病。术前3个月均未接受激素类药物治疗。所有患者月经均较规律，手术均于卵泡期进行。实验组与对照组年龄及BMI均无显著性差异（P＞0．05）。 标本采集及保存：实验组及对照组均于手术中收集PF。腹腔镜手术者在置人腹腔镜后用无菌吸管吸取PThynl。如为开腹手术则于小心剪开腹膜后立即用无菌注射器于子宫直肠窝处抽取PThlnl。置于无菌离心管中，于 2000r／ndn下离心 10分钟取上清液加人无热源试管，于一70℃冰箱内保存待测。如有血液混人则弃用该PF标本。 二、实验试剂 人LP放免试剂盒由北京北方生物技术研究所提供，该试剂盒批内变异系数＊人＜5啪，＊人＜10阮，测定范围为0．5一则n砂M。 三、方法 ＊标本检测： o）LP标准品配制：标准品为冻干品，每瓶用1．OInl缓冲液溶解后分另为：0·5，l·5，3．0，6．0，12．0，24．onyrnl； ·2· K厂勺一LP配制：‘勺一LP为冻干品，用二．Ollil缓冲液溶解； ＊）LP抗血清：LP抗血清为冻干品，用1刀rnl缓冲液溶解； k）取圆底试管若干进行编号，分别为NSB管3。－S。标准管及各标本管； O）将200叶100gi的缓冲液分别人NSB管及S。标准管中； （6）将浓度钢u为0．5，二．5，3．0，6．0，12．0，24．ong／rnl的LP标准品 100gi分另加人 S；－Se标准管中； O）将各标本100gi s帅D人各标本管中； 柠）将‘勺一Lp100gl分别加人 NSB管、SO－S6标准管及各标本管中； O）将u抗体1m…分别加人s广民标准管及各标本管中； （1）将各试管混匀，4℃温育24小时； O）将免疫分离剂 500gi分别加人各试管中； ＊）将各试管混匀，室温放置15分钟； O3）然后在2000r／ndn下离心 15分钟，吸弃上清液，测各管沉淀的放射性的计数＊Pm人 2、数据处理： 2．l 计算各管的百分结合率：以S。计数为B们各标准管计数为B，求各管的百分结合率： 2．2 用标准曲线的计算结果在半对坐标纸上，绘制B／B。％一＊ 图。 2．3 未知PF中的LP浓度，可以根据它B／B。的百分结合率从标准曲线上查出。 3、统计学方法： 采用x揭表示，应用统计学t检验及直线相关分析对各组数据进行处理。 ·3· 实验结果 l、实验组患者与对照组患者PF中LP水平的比较 实验组患者 PF中 LP 7k平为 8．2。2．6ng／ml，对照组患者 PF中 LP水平为 6．511．gng／nil，实验组与对照组患者 PF中 LP水平存在显著性差异（P＜O．05人 2、实验组中早、晚期病例患者PF中LP水平的比较 实验组中早期（I－11期）病例患者PF中LP水平为9．2。2．6ng／rnl，晚期（皿一IV期）病例患者PF中LP水平为7．4。2．3n砂M，二者间存在显著性差异（Pd．05入 3、实验组中红