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目前对于鱼肌肉和轮虫脂肪酸测定方面的比较研究很少,而脂肪酸含量的测定又是轮虫和鱼类的重要研究指标。本文研究了提取溶剂、次数以及溶剂的配比对鱼肌肉和轮虫脂肪提取的影响；升温程序对测定结果的影响；衍生化试剂、衍生化反应时间和温度对GC上机测定结果的影响；并采用了优化后的方法测定了东北地区怀头鲇、史氏鲟、池沼公鱼、黑龙江茴鱼、黑斑狗鱼五种鱼类脂肪酸含量,为其营养价值评定提供了参考。分别用氯仿甲醇体积比为2：1、1：1、1：2,苯石油醚体积比2：1、1：1、1：2,丙酮石油醚1：4、3：7、2：3作为提取溶剂,提取鱼肌肉和冻干轮虫(Brachionus rotundiformis)样品脂肪,测定脂肪含量与皂化值,筛选得出3种提取溶剂的最佳配比；比较提取次数为1-3次间脂肪含量的差异,得出最佳提取次数；将3种最佳配比与索氏提取法提取样品脂肪进行比较,测定脂肪含量与皂化值。分别筛选出鱼肌肉和轮虫脂肪提取的最佳溶剂,再对样品采用五种不同的衍生化溶剂(10%的硫酸-甲醇溶液、0.4mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液、10%的硫酸-甲醇溶液和0.4mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液、10%的硫酸-甲醇溶液和14%的三氟化硼-甲醇溶液、0.4mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液和14%的三氟化硼-甲醇溶液)进行衍生化,并设定三个不同的反应时间(5min、10min、20min),三种不同的反应温度(40℃、50℃、60℃),筛选出鱼肌肉和轮虫最佳的衍生化条件,最后分别总结得出适合鱼肌肉和轮虫脂肪酸测定的方法。用适合鱼肌肉脂肪酸测定的方法测定东北地区怀头鲇、史氏鲟、池沼公鱼、黑龙江茴鱼、黑斑狗鱼五种鱼类脂肪酸含量。结果显示,提取鱼肌肉冻干轮虫脂肪中,提取次数对样品脂肪含量无显著差异(P>0.05),故鱼肌肉和轮虫脂肪提取1次为宜。鱼肌肉脂质提取的3种溶剂的最佳配比分别为氯仿甲醇2：1、丙酮石油醚2：3和索氏提取法,其中氯仿甲醇2：1处理组的脂肪含量和皂化值分别达到12.09%和179,均显著高于索氏提取法和其余处理组(P<0.05),故鱼肌肉脂肪最佳提取溶剂及配比为氯仿甲醇体积比2：1；轮虫脂质提取的3种溶剂的最佳配比分别为氯仿甲醇2：1、苯石油醚1：2、丙酮石油醚2：3；其中丙酮石油醚2：3处理组的脂肪含量和皂化值分别达到9.71%和198,均显著高于索氏提取法和其余处理组(P<0.05),故轮虫脂肪最佳溶剂及配比为丙酮石油醚体积比2：3。本研究优化得到的最佳升温程序为：初始温度150℃(保持3min)以5℃/min的速率升高到200℃(保持2min),再以2℃/min的速率升高到230℃(保持15min)。鱼肌肉衍生化处理的最佳条件为：最佳衍生化试剂为10%的硫酸-甲醇溶液+0.4mo1/L的氢氧化钾-甲醇溶液,最佳反应时间为10min,最佳反应温度为50℃；轮虫衍生化处理的最佳条件为：最佳衍生化试剂10%的硫酸-甲醇溶液+0.4mo1/L的氢氧化钾-甲醇溶液,最佳反应时间为20min,最佳反应温度为60℃。新的优化方法比索氏提取法更节省时间,简化了实验操作过程,提高了试验效率；测定的五种鱼类怀头鲇、史氏鲟、池沼公鱼、黑龙江茴鱼、黑斑狗鱼脂肪酸含量中不饱和脂肪酸含量很高,有较高的营养价值。