【摘 要】
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鱼类是变温动物,自身缺乏体温调控系统,体温会随着水体温度的变化而变化。温度是鱼类生长过程中一个非常重要的非生物因素,影响鱼类的各项生命活动。应对低温压力,鱼类会产生三级响应。鱼类是研究温度对免疫影响的理想模型,具有完整的脊椎动物免疫系统,包括天然免疫和适应性免疫。目前,关于鱼类如何应对低温胁迫以及适应低温的分子应答机制的研究尚不明确,低温具体影响的免疫相关基因及机制还有待探究。本论文以斑马鱼为研究
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鱼类是变温动物,自身缺乏体温调控系统,体温会随着水体温度的变化而变化。温度是鱼类生长过程中一个非常重要的非生物因素,影响鱼类的各项生命活动。应对低温压力,鱼类会产生三级响应。鱼类是研究温度对免疫影响的理想模型,具有完整的脊椎动物免疫系统,包括天然免疫和适应性免疫。目前,关于鱼类如何应对低温胁迫以及适应低温的分子应答机制的研究尚不明确,低温具体影响的免疫相关基因及机制还有待探究。本论文以斑马鱼为研究对象,探究低温对斑马鱼行为和基因表达的影响,对鱼类抗寒的研究具有重要意义。对斑马鱼进行两周的低温刺激,发现斑马鱼存活率下降、游行缓慢,提取肝脏、前肠、中肠、后肠、肌肉进行转录组测序。GO和KEGG分析发现低温胁迫下免疫相关基因的表达存在差异,多种细胞因子、趋化因子的表达发生变化。为了进一步探究低温对斑马鱼免疫功能的影响,LPS刺激斑马鱼,发现低温下适应性免疫及天然免疫相关分子在肝脏中响应较慢,在肠道中多种免疫因子表达上调,可能发生免疫反应。因此,对斑马鱼后肠进行形态学及组织学分析,发现经LPS刺激后,低温下斑马鱼肠道组织发生细胞浸润、酸性黏蛋白增多,更容易引发炎症。结合转录组分析进一步探究,低温下很多炎症相关因子的表达发生变化,值得注意的是,与正常温度下基因表达情况相比,低温下DUSP2在各个组织中均表达上调。高等动物中转录因子STAT3促进炎症的发生,本研究发现DUSP2与STAT3发生相互作用,随着DUSP2表达量的增加STAT3的磷酸化程度降低,DUSP2可能通过使STAT3发生去磷酸化进而抑制STAT3炎症信号通路。DUSP2可能作为炎症的负反馈调节因子,调节鱼体内的炎症动态平衡。
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