益智仁盐炙前后组成缩泉丸的指纹图谱及入血成分比较研究

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缩泉丸始载于《妇人良方》,是治疗肾阳虚所致尿多或遗尿症的常用方,该方由盐益智仁、乌药、山药组成。盐炙可引药入肾、缓和药物燥性,方中君药益智仁盐炙后辛燥之性减弱,专行下焦,长于温肾、固精、缩尿,可增强全方的温肾缩尿效果。本文在前期研究基础之上,将益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸,采用HPLC法建立并比较了其甲醇超声提取物及石油醚部位(缩尿有效部位的)的指纹图谱;采用灰色关联法对益智仁盐炙后组成的缩泉丸进行不同提取部位的缩尿药效谱效关系研究;采用HPLC与LC-MS对缩泉丸有效部位的大鼠入血成分进行了探索,并建立了益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的血清指纹图谱,为阐明缩泉丸中益智仁盐炙增强疗效的物质基础提供依据。通过比较益智仁盐炙前后组成缩泉丸的指纹图谱,找到了相对峰面积发生明显改变的1号色谱峰,增加率为183.33%;通过缩泉丸不同提取部位在缩尿部位的缩尿药效谱效关系研究,确定了石油醚部位为其缩尿有效部位,不同色谱峰对药效的贡献大小为8号>9号>7号>11号>17号>5号>19号>29号>18号>10号>6号>12号>23号。比较益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸石油醚部位的指纹图谱发现,1,2,3,4,5,6,7,11,12,13,18号色谱峰的平均相对峰面积有明显改变(改变率>30%),且均呈增加趋势,其中1,4(香科酮),5(7-表-香科酮),7号色谱峰在前期谱效关系研究中表明对缩泉丸的缩尿药效有较大贡献,增加率分别为123.08%,90.91%,53.33%,43.75%,说明缩泉丸中益智仁盐炙后化学成分有所改变。探索缩泉丸有效部位的大鼠入血成分发现大鼠血中的移行成分有7个,分别是杨芽黄素、白杨素、益智酮甲、7-表-香科酮、益智醇、圆柚酮及其代谢产物11,12-二羟基圆柚酮,这些移行成分可能是缩泉丸发挥缩尿药效的物质基础。通过比较缩泉丸中益智仁盐炙前后的血清指纹图谱,发现二者在入血成分上差别不大,但各共有峰平均峰面积有所改变,提示益智仁盐炙后组成缩泉丸疗效增强可能与入血成分的含量上的变化有关。本论文通过指纹图谱来反映缩泉丸中益智仁盐炙前后的体内外化学成分变化,探讨了缩泉丸中益智仁盐炙后的物质基础改变;通过研究其不同提取部位的缩尿药效谱效关系及其大鼠入血成分,来阐明其发挥疗效的物质基础,同时也为益智仁盐炙后增强缩泉丸温肾缩尿作用的理论提供物质基础方面的依据。
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