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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS)是一种能给养猪业造成灾难性损失的以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病,其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。PRRSV为单股正链RNA病毒,与马动脉炎病毒(EAV)鼠乳酸脱氢酶增高病毒(LDV)和猴出血热病毒(SHFV)同属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属。其基因组全长约为15Kb,编码12个非结构蛋白和6个结构蛋白,5’端非编码区(untranlated region, UTR)含有帽子结构,3’端非编码区含有多聚腺苷酸结构。PRRSV按照基因型分为北美洲型(VR2332为代表毒株)和南美洲型(LV为代表毒株)有报道表明,宿主对PRRSV感染的天然免疫应答能力低下,病毒可呈持续性感染。PRRSV极易变异,因此本病一直是当前疫病防控的难点之一。为了从基因组水平掌握此病的遗传信息和流行规律,并为此病制定更为科学、有效的防疫措施,本研究对PRRSV地方分离毒株JX-07进行了全基因组测序。结果表明,PRRSV JX-07株基因组全长15338nt,共编码8个ORF,5’UTR为188nt,3’UTR为150nt,其与VR2332株核苷酸同源性为91.1%,与我国最早分离毒株CH1a核苷酸同源性为95.8%。尽管其基因序列与其他毒株间存有差异,但是在非编码区、ORF5、NSP1、NSP2等一些基因或区域的关键位点依然保守。为了研究PRRSV JX-07株的复制和致病机制,本研究利用反向遗传学技术将该毒株cDNA克隆至高拷贝质粒pUC18,并在其上游引入T7RNA聚合酶启动子；为便于鉴别,在ORF7引入了同义突变的分子标记—Kpn I限制性酶切位点；成功构建了全长cDNA克隆。将cDNA克隆体外转录成RNA,脂质体法转染BHK21细胞,收集细胞上清感染MARC-145,获得了一株疑似具有感染性的重组病毒。细胞感染病毒后分泌Ⅰ型干扰素(以IFN-β为代表)是宿主抗病毒免疫反应的第一道防线。本试验结果表明,PRRSV感染的MARC-145细胞中几乎检测不到IFN-β的表达,但却能够对poly(I:C)诱导的IFN-β的产生起到部分抑制作用。通过对转录因子IRF-3和NF-κB活性的测定,我们发现PRRSV感染MARC-145细胞后能部分抑制由poly(I:C)诱导产生的IRF-3的磷酸化、二聚体的形成以及这两个转录因子的入核,而且这种抑制并没有随着病毒感染量的增加而增加。因此,我们认为,PRRSV感染MARC-145细胞后并未激活Ⅰ型干扰素信号通路,相反能够部分抑制由poly(I:C)诱导的IFN-β产生。上述研究结果将有助于深入探索PRRSV的致病和天然免疫逃逸机制。