排毒保肾汤在UUO大鼠肾间质纤维化中的研究

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目的:观察排毒保肾汤对UUO大鼠肾脏组织TGF-β1、整合素α5β1以及肾纤维化标志物表达的影响;从而进一步探讨排毒保肾汤抗肾纤维化的机制。方法:将24只大鼠随即分为三组,UUO模型组10只,对照组4只,排毒保肾汤治疗组10只。术后14天3%戊巴比妥(50mg/kg)麻醉后,处死所有大鼠,留取各组大鼠右侧肾脏标本,用HE染色,光镜下观察肾脏病理改变。用Masson染色观察肾间质纤维化病变程度。用免疫组化方法,检测TGF-β1、整合素α5β1的表达。运用RealTime-PCR方法,检测TGF-β1、整合素α5β1、α-SMA、E-cadherin的mRNA的表达。实验结果采用均数±标准差表示,数据分析采用SPSS18.0统计软件统计分析,P<0.05认为具有统计学意义。结果:(1)HE染色结果显示,假手术组大鼠肾间质无明显纤维化病变;UUO组肾脏组织间质中肾小管萎缩、上皮细胞坏死、淋巴细胞、单核细胞浸润、肾间质面积增加、间质纤维化较明显;排毒保肾汤治疗组有不同程度上皮细胞坏死、淋巴细胞、单核细胞浸润、肾间质面积增加、间质纤维化等,但较UUO组明显减轻;(2)Masson染色结果显示,模型组大鼠肾脏组织可见明显肾间质纤维化病理改变,肾间质相对面积较对照组明显上升,提示造模成功,与对照组相比,有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,排毒保肾汤治疗组肾间质纤维化病理改变轻,肾间质相对面积显著下降(P<0.05);(3)免疫组化结果显示模型组TGFβ1、整合素α5β1表达明显增多,排毒保肾汤治疗组TGFβ1、整合素α5β1表达较模型组显著下降(P<0.05);(4)实时定量PCR结果显示,模型组TGFβ1、整合素α5β1、α-SMA的mRNA表达明显增多,排毒保肾汤治疗组TGFβ1、整合素α5β1、α-SMA的mRNA表达较模型组显著下降(P<0.05);模型组E-cadherin的mRNA表达明显减少,排毒保肾汤治疗组E-cadherin的mRNA表达较模型组显著上调(P<0.05)。结论:(1)排毒保肾汤具有抗肾纤维化的作用;(2)排毒保肾汤能抑制纤维化肾脏组织TGF-β1、整合素α5β1及肾纤维化标志物的表达,提示TGF-β1/整合素α5β1信号通路可能是排毒保肾汤的作用靶点。
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