【摘 要】
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目的 研究自行提取分离的低极性人参皂苷ALK对稳定MDR表型的耐阿霉素K562/ADM细胞的抑制增殖,及逆转耐药的作用,并探索其逆转作用的分子机制。方法 实验选择人红白血病细胞株
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目的 研究自行提取分离的低极性人参皂苷ALK对稳定MDR表型的耐阿霉素K562/ADM细胞的抑制增殖,及逆转耐药的作用,并探索其逆转作用的分子机制。方法 实验选择人红白血病细胞株K562及由阿霉素(Adriamycin,ADR)诱导的具有稳定MDR表型的耐阿霉素细胞株K562/ADM。选择维拉帕米(Velapamil VRP)作为阳性对照药物,MTT分析法和半固体琼脂集落培养法检测ALK抑制K562、K562/ADM细胞的增殖作用,测定非细胞毒性剂量的ALK作用后,分析IC50的变化;流式细胞术分析细胞内阿霉素的蓄积;RT-PCR检测ALK作用后细胞耐药相关基因mdr-1的表达;Western blot和免疫细胞化学检测细胞膜P-gp蛋白的表达。结果①ALK在20-100mg/L浓度范围内对K562、K562/ADM细胞的增殖均有抑制作用,抑制率4.59土0.09%-60.5±0.05%,非细胞毒性剂量ALK 20mg/L和40mg/L下能明显降低ADR对K562、K562/ADM细胞的IC50,与K562/ADM对照细胞相比(0.28土0.05,0.12±0.04 vs 2.11 土0.04,P<0.05)。ALK 逆转 K562/ADM 细胞耐药的作用,呈时间和剂量依赖性。②作用48h后,细胞内阿霉素浓度从1.47±0.21%增加到99.2±0.09%。③ALK明显下调细胞mdr-1基因的表达水平,差异有显著统计学意义(P<0.01);同时P-gp蛋白的表达水平也明显下降,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 低极性人参皂苷ALK具有逆转K562/ADM细胞耐药的作用,其作用机制可通过下调mdr-1基因及P-gp蛋白的表达,从而减少化疗药物外排而发挥其抗白血病的作用。上述研究可为ALK今后的深入研究及临床应用治疗髓系白血病提供实验依据。
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