大量研究表明肿瘤的发生、发展和演进与DNA损伤有着重要的关系。DNA损伤是环境致癌过程中早期可检测的关键步骤,其检测具有重要的毒理学意义。我室建立的依赖随机化末端连接物聚合酶链反应(Randomized terminal linker-dependent polymerase chain reaction,RDPCR)技术是在Pfeifer等建立的连接介导聚合酶链反应(Ligation-mediated polymerase chain reaction,LMPCR)的基础上建立的,可检测特定基因的DNA损伤。本室运用该技术已取得了一些重要的研究结果。但在实验过程中,发现该技术存在着杂交效率较低及特异性较差的问题。资料证明,单链探针检测的敏感性和特异性均要好于双链探针。因此将单链探针运用于RDPCR技术可能有助于解决该问题。 本研究拟采用单引物PCR法和不对称PCR法制备单链探针,并对单链探针和双链探针的杂交效果进行比较,同时将单链探针运用于RDPCR技术体内实验,检测几种环境致癌物对大鼠p53基因外显子7的损伤作用。希望能够提高RDPCR技术的敏感性和特异性,减少假阴性和假阳性结果的产生,使该技术进一步得到完善,同时探讨环境致癌物的作用机理,扩展RDPCR技术在毒理学领域的应用。