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目的枸杞多糖可以保护视神经细胞在缺血再灌注中免受损伤,但是对糖尿病脑缺血再灌注损伤中的作用还不明确,本研究探讨枸杞多糖是否可以降低高糖和缺氧条件下血管内皮细胞中血脑屏障相关因子的损伤。方法体外培养脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)细胞,采用高糖和缺氧模拟糖尿病脑缺血再灌注损伤,进而观察枸杞多糖对血管内皮细胞的作用。首先验证高糖和缺氧对HUVEC细胞形态、增殖和血脑屏障相关因子(ZO-1、Occludin、MMP-9)的作用,HUVEC细胞分为正常糖组(NG control)、高糖组(HG control)、正常糖缺氧6h组(NG+OGD6h)、高糖缺氧6h组(HG+OGD6h)、正常糖缺氧6h复氧6h组(NG+OGD6h/R6h)、高糖缺氧6h复氧6h(HG+OGD6h/R6h)、正常糖缺氧6h复氧24h(NG+OGD6h/R24h)、高糖缺氧6h复氧24h组(HG+OGD6h/R24h)。枸杞多糖干预后,OGD6h/R6h时,检测HUVEC细胞形态、增殖和ZO-1、Occludin、MMP-9表达的改变,HUVEC细胞分为正常糖组(NG control)、正常糖缺氧6h复氧6h(NG+OGD6h/R6h)、正常糖缺氧6h复氧6h枸杞多糖干预组(LBP+NG+OGD6h/R24h)、高糖组(HG control)、高糖缺氧6h复氧6h组(HG+OGD6h/R6h)、高糖缺氧6h复氧6h枸杞多糖干预组(LBP+HG+OGD6h/R6h)。结果当糖浓度为50 mmolL时,与control组相比,细胞活性为72.33%±6.84%(P<0.01);与control组相比,缺氧6h时,NG组和HG组细胞活性都降低(P<0.05);与NG组相比,HG组细胞皱缩,细胞间距增宽;缺氧6h后,NG组和HG组细胞皱缩加剧;缺氧6h复氧6h后,细胞皱缩进一步增加;缺氧6h复氧24h后,细胞形态损伤减轻,但与缺氧前相比,细胞皱缩;缺氧前,HG组比NG组有更多的MMP-9的表达和较低的ZO-1和Occludin的表达(P<0.05)。与control组相比,在OGD6h和OGD6h/R6h时,NG组和HG组中ZO-1和Occludin表达降低,并且在OGD6h/R6h时达到最低(P<0.01),随着复氧时间的增加,NG组和HG组中ZO-1和Occludin的表达增加;与之相反,与control相比,NG组和HG组在OGD6h时,MMP-9表达急剧升高(P<0.01),在OGD6h/R6h时表达开始降低(P<0.05)。LBP干预后,在OGD6h/R6h时,细胞活性升高(P<0.05),细胞皱缩程度减轻,HG组中,ZO-1、Occludin的表达升高(P<0.05),MMP-9的表达降低(P<0.05)。结论1.高糖和缺氧可能通过升高MMP-9活性来降低Occludin和ZO-1的表达从而导致HUVEC细胞的损伤。2.枸杞多糖可能通过降低高糖和缺氧条件下HUVEC细胞中MMP-9的活性来增加Occludin和ZO-1表达进而降低细胞损伤。