论文部分内容阅读
前言5-羟色胺(5-hydroxytrptamine,5-HT)广泛分布于体内各组织,作为中枢神经递质之一,参与多种中枢神经活动,如情绪控制,睡眠调节,焦虑,酒精中毒,摄食,性行为等。5-HT代谢失调可导致多种精神紊乱症状,多种酶类、受体、载体等,都会影响5-HT的生理代谢过程及其在中枢神经系统的正常调控作用;其中,色氨酸羟化酶能否正常表达具有重要的意义。色氨酸羟化酶(Tryprophan hydroxylase,TPH)是5-HT合成的限速酶,催化色氨酸生成5-羟色氨酸。TPH基因表达状况决定5-HT的生物合成,增强或减弱5-HT及其代谢物的作用强度,进而影响它在中枢神经系统的功能。TPH基因位于常染色体11p15.3-p14,全长29kbp,有13个外显子,编码由444个氨基酸组成的TPH。基因序列内存在多个遗传多态性位点,分布于上游启动区、内含子1B区、IC区、内含子7、内含子8及内含子9区。本研究选择位于TPH基因第八内含子的-T457C位点调查其在中国汉族、藏族群体中的遗传多态性,并探讨在法医学个人识别中的意义及与抑郁症的相关性。材料与方法根据文献订购引物,应用PCR技术扩增TPH基因第八内含子的-T457C位点,采用限制性片段长度多态性(RFLP)分析法,以NlaⅢ限制性内切酶消化PCR产物,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并结合银染显带的方法,对284例中国北方汉族个体、142例藏族个体、111例抑郁症个体进行-T457C位点基因分型,并选择部分样本进行测序分析,以验证RFLP分型结果的准确性。结果TPH基因-T457C位点PCR产物经NlaⅢ限制性内切酶消化、电泳后,共检出三种谱型,分别为TT型、CT型、CC型,DNA测序分析证实分型结果准确。在中国北方汉族群体中,TT型60例(0.211),CT型148例(0.521),CC型76例(0.268);T等位基因的频率为0.472,C等位基因的频率为0.528。142例藏族个体中,TT型30例(0.211),CT型64例(0.451),CC型48例(0.338);T等位基因的频率为0.437,C等位基因的频率为0.563。111例抑郁症患者中TT型31例(0.279),CT型51例(0.460),CC型29(0.261);T等位基因的频率为0.509,C等位基因的频率为0.491。讨论TPH基因-T457C位点在中国北方汉族、藏族群体中的遗传多态性分布符合Hardy—Weinberg平衡定律。其DP值分别为0.612、0.638,H值分别0.521、0.451,EPP值分别为0.187、0.185。该位点在汉族、藏族群体中隶属高等鉴别能力的遗传标记系统。抑郁症患者与中国北方汉族健康人群相比,二者的等位基因频率和基因型频率分布没有统计学差异(P＞0.05)。但是,患者组T等位基因及TT纯合子频率均明显高于对照组;而且,健康对照组女性与患者女性相比,TT纯合子频率分布有显著差异(P=0.029),提示TPH基因-T457C位点的等位基因T可能与抑郁症有关。汉族与藏族相比,等位基因频率无显著性差异(P＞0.05);二者分别与法国人群比较,则均表现出统计学差异(P=0.001,P=0.050),提示TPH基因座-T457C位点的遗传多态性分布存在种族差异。结论TPH基因-T457C位点在中国北方汉族、藏族群体中具有较好的遗传多态性,在法医学个人识别和亲子鉴定中具有较高的应用价值;该位点可作为人类遗传学研究的重要遗传标记;推测该位点等位基因T可能与抑郁症有关。