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随着石化能源日趋枯竭及其燃烧对环境的破坏,氢能被认为是最具战略意义的可替代能源。在众多制氢方法中,生物制氢技术作为一种绿色能源生产技术,备受关注。发酵微生物制氢技术因产氢效率高,对环境适应性强等优点越来越受到科学家的青睐。然而,发酵微生物制氢的关键性问题是高效产氢微生物的获得。本研究以广西扶南糖厂生化池污泥为研究对象,在厌氧条件下,对生化池污泥的发酵微生物菌群进行产氢富集。采用三层平板法(培养基-培养基-石蜡)分离纯化出70株微生物,对其中4株筛选出来的产氢微生物运用常规形态学观察和分子生物学等方法对菌株进行鉴定。16S rDNA基因序列测定表明,5A-1、6A-5、8D-7和60E均属于梭菌属。运用气相色谱分析方法对菌株的产氢能力进行分析,并分别对菌株的产氢条件进行优化,同时将其与废水处理相结合。Clostridium sp.5A-1是一株中高温产氢细菌。在温度43℃,起始pH值7.5,起始葡萄糖浓度10g/L的条件下,产氢能力最高为1847mL(H2)/L(medium)。Clostridium sp.6A-5在温度43℃,起始pH值8,起始葡萄糖浓度16g/L的条件下,产氢能力最高为2726mL(H2)/L(medium)。 Clostridium sp.8D-7是一株中温产氢菌,在温度34℃,起始pH值7,起始蔗糖浓度10g/L的条件下,产氢能力最高为3467mL(H2)/L(medium),接种废水实验时能较好的去除废水中的COD。Clostridium sp.60E是一株耐酸性中温产氢菌,在温度35℃,起始pH值5的条件下,产氢能力最高为2080mL(H2)/L(medium)。在与废水有机结合的试验中,60E能较好的利用糖蜜酒精废水制氢。