当病原体入侵时,天然免疫是多细胞生物抵御病原体入侵,迅速控制感染的第一道防线。在脊椎动物,参与这种早期免疫反应的各种细胞和分子对其获得性免疫的形成具有决定性作用。研究发现,哺乳动物Toll受体家族属于细胞因子受体或模式识别受体,能够激活类似但不完全相同的信号转导途径,从而发挥天然免疫和获得性免疫调节作用,以抵御外来微生物或寄生虫的感染。本研究以植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)共同刺激从猪脾脏和淋巴结分离的淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR技术,在国内首次以分段克隆法,克隆出猪TLR9基因胞外区、胞内区序列,片段大小分别为1820bp、1700bp。通过序列分析所克隆的猪TLR9基因胞外区、胞内区的核苷酸序列和氨基酸序列与GenBank上的登载的序列的同源性分别为98%和100%。然后,将具有识别抗原物质功能与pGEX-4T-1连接后转化大肠杆菌,经酶切、PCR和测序鉴定后,用ITPG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE电泳进行分析,结果表明,表达的重组蛋白分子量约为67KD,表达量占菌体总蛋白的20%左右,说明已成功表达了胞外区分子片段,这为TLR9基因编码蛋白结构与功能的进一步研究奠定了基础。