论文部分内容阅读
目的：对HB患儿肝组织中胸腺素β4(Thymosinβ4,Tβ4)表达水平及其临床病理意义进行研究,并从细胞分子学角度研究Tβ4在肝母细胞瘤转移中的作用及其机制,为临床HB的诊断和治疗提供理论基础。 方法：收集19例儿童HB肿瘤组织(实验组),其远端瘤旁组织作为对照组织标本(对照组),常规制作为石蜡包埋切片;应用免疫组化技术检测Tβ4、E-钙粘蛋白(E-Cadherin)和β-链蛋白(β-catenin)在儿童HB肝组织及其瘤旁对照肝组织中的表达水平;应用免疫荧光及Western-blot技术检测Tβ4蛋白在HB细胞株HepG2中的表达情况;通过RNAi(RNA interference)技术敲除HepG2中的Tβ4基因。体外划痕实验(Scratch-wound assay)探索Tβ4对HB转移的影响和可能的分子机制。 结果：HB瘤组织中Tβ4表达阳性率明显的高于其远端瘤旁对照组织,差异具有统计学意义(p<0.01)。淋巴结转移病例中,Tβ4异常高表达且细胞质和细胞核同时发现Tβ4高表达,细胞核β-catenin表达阳性率明显高于无淋巴结转移病例,差异具有统计学意义(p<0.01)。在淋巴结转移病例中,我们同时发现E-cadherin表达量却明显降低,差异具有统计学意义(p<0.01)。利用免疫荧光及Western-blot实验发现Tβ4在HepG2中表达明显增高。RNA干扰技术以及体外划痕实验发现Tβ4敲除后的HepG2细胞迁移能力显著地小于非敲除细胞,差异具有统计学意义(p<0.05)。 结论：1.Tβ4高表达于肝母细胞瘤肝组织中且与其淋巴转移相关,可以作为诊断肝母细胞瘤特别是发生淋巴转移病例的潜在分子指标,对临床诊断HB及判断有无转移可能具有诊断价值。 2.通过RNA干扰沉默Tβ4基因后发现肝母细胞瘤细胞迁移转移能力明显下降,提示Tβ4为临床治疗肝母细胞瘤淋巴转移的潜在药物靶点。