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背景
脑血管疾病(cerebrovascular disease,CVD)因其发病率、病死率、致残率、复发率高而严重危害人们的身心健康和生存质量,越来越受到人们的重视。在 CVD 的发病率中缺血性脑血管疾病( ischemic cerebrovascular disease, ICVD)可占到 60%~80%,其中大多数是由动脉血管内血栓阻塞血管所致的脑梗死。急性脑梗死的理想治疗方法是早期再通闭塞的血管,溶栓治疗可能成为最有前途治疗急性脑梗死的方法之一。溶栓治疗可在有效的时间窗内恢复血流,挽救缺血半暗带的部分损伤脑组织,但溶栓治疗的时间窗及溶栓后血流再通引起的严重并发症和再灌注损伤是目前急待解决的问题。因此,建立理想的模拟人类血栓性脑梗死的动物模型用于研究溶栓疗法至关重要,并以此进行溶栓治疗的实验研究,为进一步探讨溶栓治疗时间窗、评价溶栓药物疗效、再灌注损伤等生理病理机制及中医药治疗血栓性脑梗死带来新的启示。本研究在前期成功制备大鼠自体血栓结合线栓阻塞大脑中动脉制备局灶性血栓栓塞性脑缺血模型的基础上[1],研究溶栓与大黄苷元联合治疗对大鼠脑缺血的影响,并进一步探讨大黄苷元联合治疗的保护机制,为临床开展溶栓治疗奠定理论基础。
目的：
1.从对脑缺血大鼠神经功能缺损、脑水肿方面,评价大黄苷元联合对脑缺血后脑微血管损伤的保护机制。
2.从对脑缺血大鼠脑组织基质金属蛋白酶 9及其抑制物( MMP-9及 TIMP1)的表达和 MMP-9 活性变化的影响方面,揭示大黄苷元联合溶栓对脑缺血后脑微血管损伤的作用机制。
方法：
1.基于自体血栓结合线栓阻塞大鼠大脑中动脉制备局灶性脑缺血动物模型,测定大鼠神经功能缺损、脑水肿,观察大黄苷元、尿激酶及其联合对上述指标的影响。
2.采用免疫组织化学、明胶酶谱法,测定脑组织基质金属蛋白酶 9 及其抑制物( MMP-9 及 TIMP1)的表达和 MMP-9 活性变化,观察大黄苷元、尿激酶及其联合对脑缺血基质金属蛋白酶调节的影响。
结果：
1.大鼠脑缺血后神经功能症状和脑组织含水量变化及大黄苷元联合溶栓
对其的影响
模型组各时间点神经症状评分及脑组织含水量均较假手术组增高(P<0.01)；用药组各时间点神经症状评分及脑组织含水量均较相应时间模型组降低(P<0.05,P<0.01)；联合用药组神经症状评分及脑组织含水量较溶栓组和大黄苷元组降低(P<0.05)。
2.大鼠脑缺血后基质金属蛋白酶 9 及其抑制物( MMP-9 及 TIMP1)的表达和 MMP-9活性变化及大黄苷元联合溶栓对其表达的影响
模型组各时间组大鼠 MMP-9、MMP-9活性表达成增高趋势；与溶栓组比较,大黄苷元组、联合组各时间点 MMP-9、MMP-9活性表达减弱；溶栓组 9h和 6h组较其 3h组大鼠 MMP-9活性表达增强(P<0.01,P<0.05), 9h组较其6h组增强(P<0.01)；各溶栓组和联合组、大黄苷元 3h和 6h组 TIMP-1表达增强(P<0.01)；与溶栓组比较,联合组 6h和 9h的 TIMP-1表达增强(P<0.01)。
结论：
1.大黄苷元联合溶栓能明显改善神经功能、减轻脑水肿；可能与大黄苷元可增强溶栓效果,干预溶栓治疗时间窗有关。
2.溶栓治疗可增强 MMP-9活性表达,加重脑缺血明胶酶系统紊乱,大黄苷元联合溶栓可下调 MMP-9 表达及 MMP-9 活性,上调 TIMP-1 表达以保护微血管损伤。
脑血管疾病(cerebrovascular disease,CVD)因其发病率、病死率、致残率、复发率高而严重危害人们的身心健康和生存质量,越来越受到人们的重视。在 CVD 的发病率中缺血性脑血管疾病( ischemic cerebrovascular disease, ICVD)可占到 60%~80%,其中大多数是由动脉血管内血栓阻塞血管所致的脑梗死。急性脑梗死的理想治疗方法是早期再通闭塞的血管,溶栓治疗可能成为最有前途治疗急性脑梗死的方法之一。溶栓治疗可在有效的时间窗内恢复血流,挽救缺血半暗带的部分损伤脑组织,但溶栓治疗的时间窗及溶栓后血流再通引起的严重并发症和再灌注损伤是目前急待解决的问题。因此,建立理想的模拟人类血栓性脑梗死的动物模型用于研究溶栓疗法至关重要,并以此进行溶栓治疗的实验研究,为进一步探讨溶栓治疗时间窗、评价溶栓药物疗效、再灌注损伤等生理病理机制及中医药治疗血栓性脑梗死带来新的启示。本研究在前期成功制备大鼠自体血栓结合线栓阻塞大脑中动脉制备局灶性血栓栓塞性脑缺血模型的基础上[1],研究溶栓与大黄苷元联合治疗对大鼠脑缺血的影响,并进一步探讨大黄苷元联合治疗的保护机制,为临床开展溶栓治疗奠定理论基础。
目的：
1.从对脑缺血大鼠神经功能缺损、脑水肿方面,评价大黄苷元联合对脑缺血后脑微血管损伤的保护机制。
2.从对脑缺血大鼠脑组织基质金属蛋白酶 9及其抑制物( MMP-9及 TIMP1)的表达和 MMP-9 活性变化的影响方面,揭示大黄苷元联合溶栓对脑缺血后脑微血管损伤的作用机制。
方法：
1.基于自体血栓结合线栓阻塞大鼠大脑中动脉制备局灶性脑缺血动物模型,测定大鼠神经功能缺损、脑水肿,观察大黄苷元、尿激酶及其联合对上述指标的影响。
2.采用免疫组织化学、明胶酶谱法,测定脑组织基质金属蛋白酶 9 及其抑制物( MMP-9 及 TIMP1)的表达和 MMP-9 活性变化,观察大黄苷元、尿激酶及其联合对脑缺血基质金属蛋白酶调节的影响。
结果：
1.大鼠脑缺血后神经功能症状和脑组织含水量变化及大黄苷元联合溶栓
对其的影响
模型组各时间点神经症状评分及脑组织含水量均较假手术组增高(P<0.01)；用药组各时间点神经症状评分及脑组织含水量均较相应时间模型组降低(P<0.05,P<0.01)；联合用药组神经症状评分及脑组织含水量较溶栓组和大黄苷元组降低(P<0.05)。
2.大鼠脑缺血后基质金属蛋白酶 9 及其抑制物( MMP-9 及 TIMP1)的表达和 MMP-9活性变化及大黄苷元联合溶栓对其表达的影响
模型组各时间组大鼠 MMP-9、MMP-9活性表达成增高趋势；与溶栓组比较,大黄苷元组、联合组各时间点 MMP-9、MMP-9活性表达减弱；溶栓组 9h和 6h组较其 3h组大鼠 MMP-9活性表达增强(P<0.01,P<0.05), 9h组较其6h组增强(P<0.01)；各溶栓组和联合组、大黄苷元 3h和 6h组 TIMP-1表达增强(P<0.01)；与溶栓组比较,联合组 6h和 9h的 TIMP-1表达增强(P<0.01)。
结论：
1.大黄苷元联合溶栓能明显改善神经功能、减轻脑水肿；可能与大黄苷元可增强溶栓效果,干预溶栓治疗时间窗有关。
2.溶栓治疗可增强 MMP-9活性表达,加重脑缺血明胶酶系统紊乱,大黄苷元联合溶栓可下调 MMP-9 表达及 MMP-9 活性,上调 TIMP-1 表达以保护微血管损伤。