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第一部分Par-4在2型糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡中的影响目的:胰岛β细胞凋亡在2型糖尿病胰岛细胞功能失调中占有重要地位。既往研究发现前列腺凋亡反应因子-4(Prostate apoptosis response-4,Par-4)是一种常见的促凋亡因子,可诱导多种肿瘤细胞凋亡。但Par-4/NF-κB是否参与诱导2型糖尿病胰岛β细胞凋亡过程尚不清楚。方法:小剂量STZ+高脂饮食构建2型糖尿病小鼠模型,并敲除小鼠Par-4表达。将小鼠分为4组:正常组、糖尿病组、正常+Par-4敲除组、糖尿病+Par-4敲除组,检测Par-4,NF-κB的表达,胰岛β细胞凋亡和胰岛素分泌情况。结果:与正常组相比,正常+Par-4敲除组Par-4和NF-κB表达和分泌以及细胞凋亡,胰岛素分泌能力无显著变化,而糖尿病组Par-4和NF-κB表达显著升高,血液中Par-4的浓度升高,胰岛β细胞凋亡明显增多,分泌胰岛素的能力下降;与糖尿病组相比,糖尿病+Par-4敲除组少量表达Par-4和NF-κB,血液中Par-4的浓度较之糖尿病组有所下降,核内Par-4和NF-κB的表达有所下降,胰岛β细胞凋亡显著下降,分泌胰岛素的能力有所上升。推论:2型糖尿病可促进Par-4分泌和Par-4和NF-κB表达,诱导2型糖尿病胰岛β细胞凋亡和功能不全,敲除Par-4的2型糖尿病小鼠NF-κB表达下降,胰岛β细胞凋亡和胰岛功能不全有所改善。第二部分Par-4参与糖脂联合毒性诱导胰岛β细胞凋亡的机制研究目的:胰岛β细胞凋亡是2型糖尿病最重要的病理生理特征,内质网应激和线粒体功能失调在其中扮演了重要角色。既往研究发现前列腺凋亡反应因子-4(Prostate apoptosis response-4,Par-4)/NF-κB通过内质网应激和线粒体功能失调诱导肿瘤细胞凋亡。但Par-4/NF-κB是否通过内源性和外源性机制诱导胰岛β细胞凋亡尚未可知。方法:我们使用高糖高脂干预模拟2型糖尿病体外模型,培养好的NIT-1细胞分为:(1)正常组(C组)(2)正常+Par-4过表达组(C+Par-4组)(3)正常+Par-4抑制组(C-Par-4组)(4)高糖高脂组(H组)(5)高糖高脂+Par-4过表达组(H+Par-4组)(6)高糖高脂+Par-4抑制组(H-Par-4组),检测Par-4,NF-κB表达情况以及其转录水平活性,检测凋亡路径相关标志物;结果:我们发现在高糖高脂干预下,Par-4的表达和分泌上升,增加了NF-κB表达并激活器转录活性,诱导NIT-1细胞凋亡,过表达Par-4会加重此过程,下调Par-4会减轻该效应,同时,抑制NF-κB表达也会减轻Par-4的凋亡诱导效应。此外,我们还发现Par-4通过内质网应激-细胞膜途径和线粒体途径诱导胰岛β细胞凋亡。推论:我们的发现证实了Par-4/NF-κB是2型糖尿病胰岛β细胞凋亡中一种新的机制。