竹叶多糖的提取纯化、结构分析及活性研究

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竹子是当今世界最具有观赏价值和使用价值的植物之一,是常绿多年生的禾本科竹亚科的一种植物,在世界上分布非常广泛。全世界的竹子一共约有70多属,1200多种,分布的面积高达2千万公顷。中国因具有丰富的竹类资源和源远流长的竹子文明一直被称为―竹子王国‖。但目前对竹叶的利用还很有限,竹叶大部分还是以一种加工废弃物处理,未能得到充分的利用。为了加强对竹叶的综合利用,本研究以毛竹为研究对象,对竹叶多糖的提取纯化、理化性质及活性进行研究,通过单因素和响应面试验考察了温度、时间、固液比多糖提取率的影响,利用分步醇沉法醇沉了三部分的多糖,并利用DEAE-琼脂糖凝胶和丙烯葡聚糖凝胶对多糖进行纯化,用气相色谱考察了其单糖组成,采用尺寸排除色谱和激光光散射联用仪测定了其分子量,用红外光谱对结构做了初步的研究,并对多糖的抗氧化活性进行了探讨,试验结果如下:1.通过响应面优化,优化了提取的工艺参数。多糖最佳提取条件是:料液比1:39.03、提取温度97.09°C、提取时间2.11h,在该条件下多糖提取得率达到5.73%。2.通过分步醇沉法,分离得到了竹叶多糖BLP30、BLP60、BLP80。采用DEAE-琼脂糖凝胶和丙烯葡聚糖凝胶对BLP30、BLP60、BLP80进行纯化。BLP30分离纯化得到了4个组分,分别为BLP30-A1、BLP30-A2、BLP30-B1、BLP30-B2。BLP60分离纯化得到了3个组分,分别为BLP60-A1、BLP60-A2、BLP60-B。BLP80分离纯化得到了4个组分,分别为BLP80-A、BLP80-B、BLP80-C、BLP80-D。3.除了BLP60-B、BLP80-A、BLP80-C、BLP80-D外,其他所有的多糖由5种单糖组成,它们分别是岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。BLP60-B由岩藻糖和木糖组成,BLP80-A由岩藻糖、木糖和半乳糖3种单糖组成,BLP60-C和BLP60-D由岩藻糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成。4.采用尺寸排除色谱和激光光散射联用仪测得所有多糖分子量主要在几千到几万,其中BLP60-B分子量最小为6800,BLP60-A1分子量最大为79800。5.竹叶多糖DPPH、羟基自由基、超氧自由基均具有较强的清除活性,在相同浓度下清除超氧自由基活性方面强于Vc。而且活性的强弱与分子量大小存在一定的关系,分子量越大活性越好。
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