研究背景：子宫颈癌是女性生殖系统高发的恶性肿瘤之一，近年来该病的发病趋势呈年轻化现象，严重威胁女性身体健康，并影响生活质量。宫颈癌的发生发展是多种因素和多种基因共同参与的复杂过程，目前已经明确宫颈癌的始动因素主要为HPV持续感染，病毒基因组整合宿主细胞DNA后合成的E6/E7蛋白介导P53和Rb泛素化降解，激活端粒酶活性，导致宫颈上皮细胞脱离正常的分化程序、进入异常细胞周期、发生恶性转化。HPV转化细胞首先发生宫颈上皮内瘤变（cervicalintraepithelial neoplasia，CIN），经过CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ，最终发展为宫颈癌。HPV转化细胞除了可引起P53和Rb蛋白水平下调外，还会导致多种基因表达异常，抑癌基因RAR-β2就是其中的关键基因之一。RAR-β2是促进上皮细胞分化的重要调控因子，也是介导维甲酸发挥调控上皮细胞生长分化凋亡方面的关键受体，通过诱导分化，具有一系列的抑癌作用，多种肿瘤中均呈现降低或缺失现象，被认为是一个抑癌基因，在肿瘤的演进中扮演关键的角色。RAR-β2的表达可以诱导宫颈癌HeLa、SiHa细胞分化，降低其恶性生物学行为，通过转染RAR-β2的肺癌细胞发现，RAR-β2诱导肺癌细胞分化而增加凋亡，其缺失与肿瘤组织的分化程度有关。上皮细胞是通过正常的分化走向正常的生理衰老死亡，而不断的进行新陈代谢。Involucrin作为上皮细胞终末分化早期的一个标记，也是肿瘤组织分化程度的一个标记。只有在上皮细胞分化成熟时才表达，肿瘤组织中细胞异型性增加、分化异常，呈去分化状态，Involucrin的表达也就随之减少，组织分化程度逐渐降低。表观遗传是由生物学家Conrad Waddington在1939年首次提出，目前，表观遗传被定义为DNA序列不发生变化，而基因表达却发生了可遗传的改变，主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、非编码RNA等等，其中组蛋白乙酰化修饰是尤为重要，是一种重要基因表达调控的模式。通常认为组蛋白氨基末端赖氨酸残基高度乙酰化使染色质结构松散，DNA与组蛋白八聚体解离，核小体结构松弛，从而使各种转录因子和协同因子能与DNA结合位点特异性结合，有利于基因转录激活，而组蛋白低乙酰化使染色质结构卷缩导致基因沉默或抑制，组蛋白的高乙酰化和低乙酰化动态平衡的调控靶基因的稳定表达，维持细胞正常的生理功能和表型。当组蛋白乙酰化状态失衡，即乙酰化水平降低时，将引起相应的染色质结构和基因转录表达异常，影响细胞周期、分化、增殖、凋亡相关基因的表达，而导致肿瘤的发生和进展，是肿瘤病理生理过程中重要的分子事件之一。宫颈癌发生过程中，表观遗传改变不仅可影响HPV致癌基因的异常表达，而且还可导致宿主细胞多个癌基因的激活和抑癌基因的失活。本研究利用临床组织标本检测组蛋白乙酰化修饰水平与抑癌基因RAR-β2在不同病变级别宫颈组织中的表达情况，分析两者的相关性及与宫颈病变程度、临床病理特征的关系，探讨两者在宫颈癌发生发展中的作用。目的：探讨组蛋白乙酰化修饰水平对RAR-β2表达的调控作用，并分析其与宫颈病变程度之间的相关性。方法：1.分别选取正常宫颈20例、CINⅡ-Ⅲ29例、子宫颈鳞状细胞癌（cervical squamouscell carcinoma,SCC）80例存档于病理科的石蜡包埋组织标本，采用免疫组织化学染色SP法检测AcH3、RAR-β2、Involucrin的表达水平，半定量积分法判定染色阳性结果。2.收集正常宫颈6例、CINⅡ-Ⅲ8例、SCC10例新鲜组织标本，采用Western blotting检测AcH3、RAR-β2、Involucrin的表达水平，胶片成像条带灰度分析显影结果。3.分析数据采用SPSS13.0统计学软件行χ2检验和t检验，各指标间相关性采用Pearson correlation分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果：1.免疫组化检测AcH3、RAR-β2、Involucrin在正常宫颈、CINⅡ-Ⅲ和SCC组织中的表达显示，随着宫颈病变程度加重，三者的表达逐渐降低，甚至缺失，各组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。2.组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达的呈正相关性（r=0.734，P＜0.05），随着宫颈病变的进展，两者的表达同步降低。3.组蛋白乙酰化水平和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关性（r=－0.547（AcH3），r=－0.585（RAR-β2），P＜0.05），即宫颈病变程度越重，两者的表达越低。4.Western blotting检测AcH3、RAR-β2、Involucrin在正常宫颈、CINⅡ-Ⅲ和SCC组织中的表达显示，与免疫组化结果一致，即随着宫颈病变程度加重，三者的表达依次降低，甚至缺失，各组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。5.免疫组化检测AcH3、RAR-β2、Involucrin在SCC高、中、低分化组织中的表达显示，三者在高分化组织中的表达高于中、低分化组织，低分化组织中三者的表达明显缺失，即随着分化程度的降低，三者的表达依次降低，甚至缺失。6.组蛋白乙酰化水平、RAR-β2的表达在SCC临床病理特征中分析显示，两者与临床分期、有无盆腔淋巴结转移无关，而与肿瘤组织的分化程度有关，两者在高、中、低分化组织中的比较存在明显差异，具有统计学意义（P＜0.05）。7.组蛋白乙酰化水平与RAR-β2的表达在SCC组织中呈正相关性（r=0.427，P＜0.05）。8.Western blotting检测AcH3、RAR-β2、Involucrin在SCC高、中、低分化组织中的表达显示，与免疫组化结果一致，即随着分化程度的降低，三者的表达依次降低，甚至缺失，各组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：1.宫颈上皮细胞RAR-β2的表达受组蛋白乙酰化修饰水平的调控。2.组蛋白乙酰化程度和RAR-β2的表达水平与宫颈病变进展密切相关，可作为宫颈病变进展风险和预后的评价指标及可能的治疗靶点。