姜黄素通过调节NGAL基因表达对乳腺癌MDA-MB-23细胞侵袭能力的影响

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hqxx03447
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目的:通过研究姜黄素对侵袭相关因子中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)表达的调控,初步探讨姜黄素在防治乳腺癌侵袭转移中可能存在的新作用机制。   方法:以高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB-231为研究对象,采用不同剂量姜黄素处理并使用NF-κB特异性抑制剂Bay-117082(20μmol/L)对比观察。MTT法检测姜黄素对细胞的毒性作用,Transwell Matrigel法观察细胞的侵袭能力,黏附实验观察细胞的黏附能力,Western blot检测细胞中NGAL、MMP-9、IκBα及P-IκBα蛋白的表达水平,RT-PCR检测细胞中NGAL、MMP-9 mRNA的转录水平,明胶酶谱法检测细胞中MMP-9活性的变化。   结果:姜黄素对乳腺癌细胞生长的抑制呈时间和剂量依耐性。但当作用时间≤24h,剂量≤15μM时对细胞无明显毒性作用。Transwell侵袭实验和黏附实验结果显示,随着姜黄素浓度的增加细胞降解Matrigel及随后穿膜能力和黏附能力逐渐降低,以15μM姜黄素作用效果最强,与NF-κB特异性抑制剂Bay-117082作用相似。Western blot结果显示,姜黄素对NGAL、MMP-9、P-IκBα蛋白表达的抑制作用呈剂量依赖性,且15μM姜黄素作用效果与NF-κB特异性抑制剂Bay-117082相似;但姜黄素及Bay-117082对IκBα的蛋白表达无明显影响。RT-PCR结果显示姜黄素显著抑制NGAL及MMP-9 mRNA表达,其抑制作用呈浓度依赖性,且Bay-117082抑制NGAL及MMP-9 mRNA表达作用与15μM姜黄素相似。明胶酶谱法结果显示,随着姜黄素浓度的增加,对MMP-9活性的抑制作用逐渐增强,且Bay-117082对MMP-9活性的影响与15μM姜黄素作用相似。结论:姜黄素可能通过抑制NF-κB信号通路的活化及此信号通路靶基因NGAL的表达显著减弱乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭性。
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