竹叶提取物和杜仲提取物体外抗癌活性研究

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竹叶具有良好的抗氧化,抗衰老,降血压、免疫调节、抗肿瘤等活性。杜仲具有良好的降压、补肾、抗菌消炎、增强免疫力和抗癌的活性。本论文以竹叶提取物(Bamboo leaves Extract,以下简称BLE)和杜仲提取物(Eucommia ulmoides extract,以下简称EUE)为研究对象,采用高效液相色谱法(HPLC)法对上述2种提取物中的主要成分的含量进行了测定,采用MTT法测定了提取物的抗癌活性。对上述提取物所含的7种单一成分对3种细胞即人结直肠癌细胞(HCT116)、宫颈癌细胞(Hela)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的抑制作用进行了实验研究,筛选出兼具抗癌和抗血管生成活性的成分。并通过流式细胞仪分析对其作用机制进行了探究。论文的主要研究成果如下:1.BLE中6种成分荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷、咖啡酸和绿原酸得含量分别为4.47%、5.26%、0.37%、1.14%、0.07%和0.42%;EUE中2种成分京尼平苷酸、绿原酸的含量分别为13.29%、3.41%。2.采用MTT法,以HCT1 16人结直肠癌细胞为细胞模型,对上节中提及的7种单一成分及阳性对照药进行了抗癌活性比较研究,结果表明,异牡荆苷对HCTl 16细胞增殖的抑制作用效果最好。以 Hela宫颈癌细胞为细胞模型,对7种单一成分及阳性对照药进行抗癌活性研究,结果表明:7种单一成分对Hela细胞增殖的抑制效果均不及阳性对照药顺铂好,但牡荆苷、异牡荆苷和绿原酸的抑制效果相对较好。当绿原酸的质量浓度从40 μg/mL增至640 μg/mL,抑制率从0.41%增至40.67%,其浓度与抑制率具有良好的线性关系。但牡荆苷和异牡荆苷呈现的规律有所不同。3.采用MTT法,以人脐静脉内皮细胞HUVEC为细胞模型,对7种单一成分及阳性对照药进行了抗血管生成活性研究,结果表明:7种单一成分对HUVEC细胞增殖的抑制效果均没有阳性对照药顺铂的好,牡荆苷、异牡荆苷和绿原酸在7种成分中相对较好。论文的实验研究还获得了其量效关系变化情况。4.采用Annexin V联合PI法,经流式细胞仪分析得,BLE对HCT116细胞的凋亡具有一定的诱导作用,但随着其浓度的增加,诱导作用逐渐减小;EUE对HCT116细胞的凋亡具有一定的诱导作用,但浓度依赖性不明显;异牡荆苷对HCT116细胞的凋亡也具有一定的诱导作用,但随着其浓度的增加,诱导作用逐渐减小,80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL的异牡荆苷处理组对HCT116细胞的凋亡率分别为12.30%、9.00%、9.20%,比200 μg/mL、400μg/mL、800μg/mL的BLE处理组和EUE处理组的都要高。这说明异牡荆苷对HCT116细胞凋亡具有相对较好的诱导作用。论文的研究结果为其抗肿瘤机制的进一步揭示奠定了的基础。
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