日粮纤维和能量互作对后备母猪子宫发育的影响

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子宫发育(子宫角长度、子宫内膜的厚度)与母猪的繁殖力有着紧密联系,而母猪后备阶段是子宫发育的关键时期。课题组前期研究发现,日粮高能摄入能够促进后备母猪初情日龄提前,并影响母猪繁殖性能。妊娠母猪在摄入高纤维后能提高妊娠早期胚胎存活率与终身繁殖力,这可能与母猪子宫发育也有一定关系。然而,日粮纤维和能量对后备母猪子宫发育的研究至今未见报道。因此,本研究探究日粮纤维和能量互作对后备母猪子宫的生长发育的影响,并探寻其可能机制。试验选取同批次体重与背膘相近的LY后备母猪32头(体重91.7±3.7 kg,背膘9.8 mm左右,日龄161.5±0.5 d;Means±SD)随机平均分到四个处理组中,每处理组8个重复,每个重复1头母猪。试验采用2×2因子设计,即能量摄入水平(低能量摄入水平LE:7.9 Mcal/d DE,高能量摄入水平HE:10.0 Mcal/d DE)和日粮纤维摄入水平(低纤维摄入水平LF:300g/d DF,高纤维摄入水平HF:600g/d DF)。试验每天基础饲粮饲喂量为2.4kg,高能及高纤维摄入水平是分别在基础饲粮饲喂基础上通过添加大豆油(240 g/d)提供额外能量,添加饲粮纤维(300 g/d)提高纤维水平实现。母猪于第四个发情周期第19天屠宰,收集子宫组织。试验结果如下:1)高能量水平摄入使得后备母猪初情日龄显著提前(P<0.05),提高了后备母猪全期日增重(P<0.01)。高日粮纤维摄入极显著提高子宫相对重(P<0.01)、子宫角长度P<0.01)和输卵管长度P<0.01)。高纤维水平和高能量水平无明显互作效应。2)采用Label-Free非标记技术分析四个处理组后备母猪子宫角蛋白差异,结果发现:用聚类热图对每个样品中蛋白相对含量进行聚类分析,LEHF与HELF两组蛋白数量、性质、功能差异最大。以LEHF组为对照,其余三组与其进行差异蛋白韦恩分析(蛋白组平均丰度水平的差异倍数大于2或小于0.5倍变化且P<0.05可鉴定为差异蛋白)结果发现:LEHF组与HELF组存在独有的30个差异蛋白,其中19个蛋白上调(如:半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cystatin,CST3)、富含丝氨酸/精氨酸剪接因子10亚基1(Serine/arginine-rich splicing factor 10 isoform 1,SRSF10)、小核核蛋白E(Small nuclear ribonucleoprotein E,SNPRE),主要参与了剪接过程;11个蛋白下调(如原肌球蛋白碎片(Beta-tropomyosin(Fragment),TPM2),肌动蛋白α骨骼肌(Actin,alpha skeletal muscle),主要参与子宫肌层活动的过程。这些差异蛋白主要参与了子宫内膜、肌层活动过程,包括血管重塑、子宫细胞基因剪接,且差异蛋白通过KEGG注释发现主要富集在剪接通路上(spliceosome),通过影响剪接过程影响组织的生长发育。3)高日粮纤维摄入有增加后备母猪子宫内膜的厚度的趋势(P<0.1),同时有降低子宫肌层的厚度的趋势(P<0.1);高日粮纤维摄入显著提高子宫角DNA含量(P<0.05)。4)高能量摄入能够显著提高后备母猪血液中雌激素的浓度(P<0.05)。5)高日粮纤维摄入显著降低后备母猪子宫角的雌激素受体α的mRNA表达(P<0.05),显著降低Bax的mRNA表达(P<0.05),且有降低Caspase3 mRNA表达的趋势(P<0.1);高能量摄入则有降低后备母猪子宫角组织Bcl-2 mRNA表达的趋势(P<0.1)。6)高日粮纤维摄入显著提高后备母猪血清中血清素的含量(P<0.05),极显著提高子宫角组织中血清素的含量(P<0.01)。7)高日粮纤维摄入能够显著抑制后备母猪子宫角组织中Caspase3蛋白的表达,并促进Akt蛋白磷酸化(P<0.05);高能量摄入也有促进Akt磷酸化水平有升高的趋势(P<0.1)。能量与日粮纤维的互作下,ERK磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论:本试验条件下,高能量摄入使后备母猪发情提前,提高血液中雌激素的浓度,但并不影响子宫发育;日粮纤维摄入能够抑制后备母猪青春期子宫发育过程中组织细胞凋亡,提高增殖期子宫内膜厚度,促进了后备母猪子宫发育。
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