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目的： β-地中海贫血是最常见的单基因遗传病之一,重型β-地中海贫血死亡率极高,预防该病主要依赖于基因诊断,但常用的反向斑点杂交法耗时长、结果不稳定,有时出现假阳性与假阴性,而高分辨率熔解曲线分析(HRM)具有快速、灵敏度高、价格低廉等优点。本研究旨在建立检测常见β-地中海贫血突变的HRM方法,并进一步探讨该方法在产前诊断应用的可行性,以期建立β-地中海贫血产前基因诊断的第二技术验证平台。 方法： 1.选取1例经测序证实的无β-珠蛋白基因突变的健康对照者、21例经测序证实基因型为-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72,-28/CDs41-42,-28/CD17、-28/IVS-Ⅱ-654、-28/CDs71-72的基因组DNA,建立应用HRM检测常见β-地中海贫血基因突变的方法。 2.应用建立的HRM方法随机检测78例父母双方均为β-地中海贫血突变携带者的产前诊断标本(羊水、脐血、绒毛),同时行反向斑点杂交法(RDB)及DNA测序对比实验。 结果： 1.所建立的HRM法能准确检测出21例β-地中海贫血突变,包括-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72,-28/CDs41-42等 2.HRM法对78例父母双方均为β-地中海贫血基因携带者的产前诊断标本进行检测,结果显示:与RDB法及DNA测序结果一致,且通过测序发现了一个SNP位点:c.316_185C>T。 结论： 所建立的HRM方法具有简便、准确、灵敏度高等优点,有望在产前诊断领域检测β-地中海贫血基因突变方面有很好的应用前景。