骨化三醇对UUO大鼠肾小管上皮细胞—间质转分化的影响

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目的:本实验旨在检测3~4周龄雄性SD大鼠单侧输尿管梗阻模型(UUO模型)肾组织中α-肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-Cad)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA的表达,从而探讨骨化三醇对UUO大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化(EMT)的干预效应及相关机制。方法:将54只3-4周龄的雄性SD大鼠随机等分为3组:假手术组18只、UUO模型组18只及UUO模型骨化三醇干预组18只,采用单侧输尿管结扎的方法制备大鼠肾间质纤维化模型(UUO模型)。于手术后第1天起,干预组给予骨化三醇0.1ug/(kg·d)溶于0.2ml的花生油中灌胃,其余两组均给予等量花生油灌胃。灌胃分别满3天、7天、14天使每组各取6只大鼠并处死,取大鼠肾组织。利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组大鼠肾组织中α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA表达水平变化。结果:1.采用单侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型成功,结扎侧肾脏体积明显变大,皮质变薄。2. RT-PCR法检测各组各时间点肾组织中α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA表达结果:假手术组大鼠肾组织α-SMA、TGF-β1mRNA表达表达甚微,E-Cad、BMP-7mRNA表达非常丰富,各时间点组内差异无统计学意义(P>0.05);随着梗阻时间的延长,UUO模型组大鼠肾组织中α-SMA、TGF-β1mRNA表达进行性上调(P<0.01),且较假手术组显著增加(P<0.01),而UUO模型组中E-Cad、BMP-7mRNA表达进行性下降(P<0.01),且较假手术组明显减弱(P<0.01);与UUO模型组相比,UUO模型骨化三醇干预组各时间点α-SMA、TGF-β1mRNA表达明显受抑,差异有统计学意义(P<0.01),但仍显著高于假手术组(P<0.01),而E-Cad、BMP-7mRNA表达较UUO模型组明显增加,但仍显著低于假手术组(P<0.01)。结论:本实验研究进一步说明了UUO模型大鼠肾组织内α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA的表达变化与肾小管上皮细胞-间质转分化(EMT)的关系:骨化三醇能够在一定程度上抑制UUO模型大鼠肾小管EMT的发生和发展,且这种保护作用至少部分可能是通过上调BMP-7mRNA及下调TGF-β1mRNA的表达来实现的。
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