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本研究分为二部分:
第一部分、金钗石斛中石斛碱的分离和提取
目的:建立从金钗石斛中提取和纯化石斛碱的方法与工艺。
方法:采用正交实验设计,以石斛生物总碱含量为指标,考察乙醇浓度、乙醇pH值、提取时间、料液比等因素的影响,将所得的生物总碱进一步利用反相高效液相色谱法进行分离,制备石斛碱。
结果:金钗石斛生物总碱最佳提取条件为乙醇浓度80%,乙醇pH3.0,提取时间2 h/次(共提取3次),料液比为1:10;使用高效液相色谱法制备后得到的石斛碱纯度大于95%。
结论:该方法简单、重现性好,得到的石斛碱单体纯度高,可为开发利用石斛碱提供基础研究资料。
第二部分、石斛碱在大鼠体内的药物代谢动学
目的:研究石斛碱在正常大鼠体内的药物代谢动力学。
方法:建立检测大鼠生物样品中石斛碱的方法,色谱条件为Agilent ZORBAX SB-CN C18色谱柱(150 mmX4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(70:30);流速1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长223 nm;进样量20.0μL。大鼠静脉注射单剂量石斛碱20 mg/kg后,采用高效液相色谱法测定大鼠血浆、组织、粪便、尿液中的石斛碱。用DAS药动学程序对血药浓度-时间数据进行拟合并计算药物代谢动力学参数。
结论:静注给药后,石斛碱在大鼠体内呈二室开放模型,并可在体内迅速广泛分布,同时从血浆中代谢消除迅速,部分以原型从尿液中排泄。