双微体(DMs)是肿瘤细胞中基因扩增的常见遗传学结构，DMs主要含有癌基因和耐药两类基因，因此它的存在与肿瘤发生、演进及预后密切相关。卵巢癌是常见妇科肿瘤，因其发病隐匿、缺乏完善的早期诊断方法，病例发现晚疗效又差，死亡率一直高居榜首。本研究以DMs为切入点，通过临床病理组织与细胞系相结合，探讨DMs的结构、成份、起源及形成机制，揭示卵巢癌中DMs存在及基因扩增的重要作用，鉴定寻找新的卵巢癌分子标志物，为卵巢癌诊疗的改进提供新的思路。 首先通过中期分裂相直接观察及间期FISH两种方法鉴定卵巢癌病例中DMs的阳性率：对20例新鲜卵巢癌组织直接培养，10例得到中期分裂相，2例发现DMs，阳性率20％；以4个癌基因(C-MYC、EIF5A2、N-MYC和AUKA，Cen3和Cen8为对照)的BAC克隆为探针应用间期核FISH检测40例癌组织，9例含DMs，阳性率22.5％。对其分析可知，DMs阳性病例多为高龄(>50岁，88.9％)、高分期(88.9％)、低分化(55.6％)和高复发(77.8％)的浆液型(55.6％)卵巢癌，提示这些病例恶性程度高，预后不良，且DMs阳性病例在不同年龄组中与阴性病例存在显著性差异(P<0.05)。在分析各个癌基因扩增与临床参数的相关性时发现C-MYC扩增在不同年龄组，不同分期中存在显著性差异；AUKA扩增在不同病理类型中存在显著性差异；其他基因和着丝粒均出现明显变化，与临床参数有一定相关性，但无统计学意义。 其次，以人卵巢癌细胞UACC-1598为模型，将基因组BAC克隆及染色体作为探针应用FISH方法探讨了DMs的组成及起源，连续的基因组BAC探针证实DMs的扩增子为一段完整的基因组序列，并具有唯一的染色体起源，因两端DNA双链断裂而从染色体上脱落，Fiber-FISH实验表明DMs由原片段复制而来，为1-4次重复，并建立了应用流式细胞仪分选获得双微体的方法；另一方面，Western检测表明出现基因组不稳定性的肿瘤组织Ku70与P53表达上调，含有DMs的人卵巢癌细胞系UACC-1598和小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3 MTX100中Ku70与P53表达高于配对细胞系，采用RNAi方法封闭NIH3T3 MTX100中Ku70蛋白的表达，探讨Ku70与DMs形成的相关性，结果表明Ku70表达下降后，P53表达随即降低，且一些NIH3T3 MTX100细胞中DMs数量有所下降，提示两种蛋白可能通过相互作用参与DMs形成。