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目的：应用RNA干扰技术研究靶向hTERT的siRNA对喉癌Hep-2细胞系的干扰作用。方法：在GeneBank上查找人hTERT mRNA的全序列(GeneID：4507438)，记录从AUG启动子的AA及下游19个核苷酸肽作为潜在作用靶点。GC含量控制在30％-65％之间。由BLAST分析排除与其它基因有高度同源性的序列。本实验选择了三条序列作为靶序列并由靶序列分别设计合成出对应的正、反义寡核苷酸肽模板。siRNA通过转染载体Lipofectamine 2000脂质体转染Hep-2细胞，转染24小时后收集并固定细胞，荧光显微镜下观察转染效果。检测指标时，收集转染48h后的细胞，进行RT-PCR、MTT法和形态学检测，观察其干扰效果。结果：FAM标记的siRNA转染入细胞Hep-2 24小时后，收集细胞在荧光显微镜下可见荧光小点，而未转染siRNA的细胞未见荧光，说明siRNA己经成功转染入细胞内。RT-PCR结果显示，只有hTERT siRNA阳性组特异性降低hTERT mRNA表达水平，而阴性对照组siRNA对靶基因表达无影响。MTT和形态学结果可见，转染hTERT siRNA阳性组Hep-2细胞生长明显受抑制。结论：1．采用生物信息学的方法能设计出有效siRNA；2．hTERT siRNA可通过降低hTERT mRNA水平特异性抑制hTERT蛋白质的表达；3．有效的hTERT siRNA能够促进Hep-2细胞凋亡，抑制其生长。