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人巨细胞病毒（HCMV）是一种β疱疹病毒。近年来的研究显示在人类多种类型肿瘤组织中存在HCMV感染和病毒基因表达，并可能与肿瘤的恶性程度有关，这提示HCMV感染可能在人类某些类型肿瘤的形成和发展过程中扮演着重要的角色，有可能是一种新的人类肿瘤相关病毒。HCMV基因产物可通过多种细胞信号通路抑制细胞凋亡、促进细胞增殖、侵袭、转移，也能促进微血管的生成及血管壁的损害，并形成独特的免疫逃避机制躲避机体的免疫反应。深入研究HCMV感染与肿瘤的病因学关系及其作用机制，可为肿瘤的临床防治提供新思路。颅咽管瘤是儿童和青少年最常见的颅内先天性肿瘤，约占颅内肿瘤的4%。颅咽管瘤的临床表现通常复杂且严重，治疗很棘手，手术往往难以彻底切除，放化疗效果较为有限，肿瘤复发率高，预后差。目前有关颅咽管瘤的病因学和发病机制尚不完全清楚，这也是临床上缺乏有效防治方法的一个重要因素。HCMV感染是否与其发生有关，国内外尚未见报道。本实验采用免疫组化方法和real-time PCR方法分别检测颅咽管瘤组织和正常脑组织中HCMV抗原表达情况和基因含量水平，分析HCMV感染与颅咽管瘤发生发展及临床特征的相关性。第一部分颅咽管瘤组织中人巨细胞病毒抗原表达的检测1.方法：2006年6月至2010年12月在西京医院神经外科行手术切除且经病理确诊为颅咽管瘤的患者89例，及行颅内高压造瘘手术部分切除的正常脑组织10例。以上手术均由有丰富经验的术者完成，在手术中收取适量标本，迅速放入足量甲醛溶液中固定；充分固定后，石蜡包埋，切片厚4μm，二氨基联苯胺（DAB）染色，苏木素复染，检测HCMV立刻早期蛋白1-72和磷酸化糖蛋白65抗体的表达情况，进而探讨HCMV感染与颅咽管瘤发生发展的关系。2.结果：1.HCMV抗原在颅咽管瘤和正常人脑组织中的表达HCMV IE1-72和pp65抗原在颅咽管瘤细胞的胞浆和胞核中都有棕黄色或棕褐色均质颗粒，在肿瘤组织上皮细胞中呈不均匀分布。颅咽管瘤组织中HCMV IE1-72和pp65抗原阳性率分别为77.5%和84.3%，而正常人脑组织全为阴性。HCMV IE1-72和pp65抗原表达阳性率在颅咽管瘤组织和正常人脑组织之间均有显著性差异（χ2=22.045，P=0.000；χ2=30.324，P=0.000）。2.HCMV抗原表达与颅咽管瘤临床病理学特征的关系HCMV IE1-72抗原在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织中阳性率分别为83.6%和67.6%，pp65抗原在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织中阳性率分别为89.1%和76.5%；两抗原在牙釉质型颅咽管瘤组织中的阳性率均略高于鳞状乳头型，但差异均无显著性(χ2=2.234，P=0.135；χ2=1.662，P=0.197)。IE1-72抗原男性阳性率为81.6%，女性为72.5%；pp65抗原男性阳性率为81.6%，女性为87.5%；IE1-72和pp65两抗原阳性率在性别间有差异，但差异无显著性（χ2=0.595，P=0.440；χ2=0.215，P=0.643），IE1-72和pp65两抗原阳性率与患者年龄亦无明显相关性（r=0.009, P=0.930;r=0.056, P=0.599）。3.结论：1.颅咽管瘤组织中HCMV抗原表达阳性率显著高于正常脑组织，提示HCMV感染可能是一个诱发颅咽管瘤发生的重要病因，并有可能促进肿瘤的演变。这对于临床预防和治疗颅咽管瘤有一定的启示作用。2.HCMV抗原表达阳性率在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织间差异无显著性，但牙釉质型略高于鳞状乳头型，仍提示HCMV感染可能与颅咽管瘤的不同病理组织类型发生及演变有关；在男女性别间有差异，但无显著性，这与HCMV感染流行病学特征女性感染率高于男性不一致，可能与本组样本量较小及实验方法有关，也可能颅咽管瘤组织HCMV抗原表达与性别有一定关系。其致病机理需要进一步研究。第二部分人巨细胞病毒基因在颅咽管瘤组织中的定量检测1.方法：在拟诊为颅咽管瘤的患者进行手术的过程中收集适量新鲜的病变组织，立即放入液态氮中冷冻，然后存于—80℃冰箱中备用。手术均由有丰富经验的术者完成。以病理报告为主要依据，排除非颅咽管瘤的标本，完全囊变组织标本和全钙化组织标本，共收集9例。定量检测HCMV基因在颅咽管瘤组织中的含量，进一步明确HCMV感染与颅咽管瘤发生发展的关系。2.结果：9例组织中HCMV基因定量全为阴性，但其中1例有阳性趋势，提示HCMV核酸有可能存在于颅咽管瘤组织中，但含量甚微，以至难以检测到，需要进一步优化实验方法和把握实验细节，也可能HCMV核酸潜伏于附近的其他组织。3.结论：采用实时定量方法检测颅咽管瘤组织中HCMV核酸结果为阴性，可能是因为HCMV核酸在颅咽管瘤组织中含量较低，但不能排除HCMV感染不存在于该组织中，可能与本实验样本量较小、实验方法不够优化、细节掌握不够有关。这可能与HCMV感染后其分布与机体的细胞类型或功能有关系，比如腺体或体液中。