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有机磷农药因其高效、广谱、低毒、易生物降解,自20世纪60年代后逐渐取代DDT等有机氯农药。但是它也像其它类型农药一样,过度施用对人类和环境带来了不良后果,尤其以影响农产品的质量安全最为直接,故近年来对其残留的检测,尤其是蔬菜中农药残留的快速检测成为公众关注的热点。传统的有机磷农药检测方法主要有色谱法、质谱法和光谱分析法等,但都存在耗时长、成本高等缺点,难以满足现场快速检测的实际需要。 酶抑制法作为一种快速检测果蔬中农药残留的筛选方法,与传统的化学分析和仪器分析法相比,克服了分析时间长、成本昂贵等缺陷。它直接用抑制率高低来表示农药残留程度的大小,直观、简便、灵敏,并能在较短的时间内筛选出大量的超标样品,进而缩小定量检测范围,将一部分含农药残留量高的果蔬产品阻挡在市场之外,避免中毒事件的发生,以达到保护消费者身体健康的目的。 本论文首次以甲基纤维素为载体,制备了一种基于抑制乙酰胆碱酯酶的电位型生物传感器。文中探索了甲基纤维素浓度和用量、甲基纤维素与N,N-二甲基甲酰铵(DMF)的配比、酶含量、底物溶液的浓度、酶固定化时间等酶电极制备条件的选择,还考察了待测溶液pH值、酶促反应时间、电极工作环境对酶电极检测过程的影响,确定了酶电极的最佳工作环境,并进行了酶电极的稳定性和重现性测试和讨论。 通过研究获得了最佳的酶电极制备条件,即甲基纤维素的浓度为0.2%、用量为15μL,甲基纤维素与N,N-二甲基甲酰铵(DMF)的配比为3:1,酶含量为3.5U/电极,酶固定化时间为8h。研究还获得了最佳的测试条件,即底物溶液的浓度为10-3mol/L,待测液pH为9,酶促反应的平衡时间为10min。论文还对H+的传质过程进行了分析,结果表明搅拌过程会导致传感器检测灵敏度的降低。 本文以甲胺磷、甲拌磷、对硫磷、毒死蜱和乐果等5种有机磷农药为检测对象,获得了上述5种有机磷农药的抑制时间,其结果分别为5,9,7,3和7min。并且用酶电极对甲胺磷进行了精密度的测定,相对标准偏差(RSD)为0.63%(n=6)。采用此酶生物传感器检测上述5种有机磷农