灵芝多糖的分离纯化和生物活性的研究

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本论文以灵芝子实体作为实验材料,对灵芝多糖的分级提取、含量测定、纯化技术、结构鉴定、生物活性以及灵芝多糖与有机锗对活性的影响进行了研究。 通过对灵芝子实体进行热水浸提,发现在90℃、1:15料比提取1.5小时,粗多糖得率为0.75%,再1:10料比提取1小时,两次浸提粗多糖得率为1.02%;通过对灵芝水提浓缩液在不同乙醇浓度下醇沉量进行研究,发现在40%乙醇浓度沉淀多糖、65%乙醇浓度沉淀多糖、80%乙醇浓度沉淀多糖在灵芝粗多糖所占比例为0.31:0.27:0.42; 将三种粗多糖过DEAE—52纤维素离子交换柱,用0.1mol/L的氯化钠溶液洗脱,苯酚—硫酸法检测收集多糖部分。用MW3500透析袋透析,冷冻干燥后,再过Sephadex G-75柱,获得40%级分有组分GLP1、GLP2,65%级分为组分GLP3、80%分级分为组分GLP4; 采用UV、IR、GC进行结构分析,结果表明:UV扫描证明GLP1、GLP3、GLP4均有蛋白质吸收峰;IR分析表明GLP3、GLP4多糖是以β型糖苷健相连结的杂多糖;GC表明灵芝多糖的组分单糖有:半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖和岩藻糖,但不同分级单糖组分不同: 用凝胶过滤法测定灵芝多糖GLP1、GLP3、GLP4的分子量分别为4.89×10~4、2.14×10~4、0.99×10~4。 选用不同分级的粗多糖以10mL/只/天,有机锗20mg/只/天分别对小鼠连续灌胃10天,发现40%乙醇浓度沉淀多糖、65%乙醇浓度沉淀多糖、80%乙醇浓度沉淀多糖均能提高小鼠的白细胞吞噬作用和肝功能作用,但65%和80%两级较为明显。添加有机锗后可提高灵芝多糖的生物活性。
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