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目的:
通过对小鼠皮下注射不同浓度的苯、甲苯以及包头水,来观察小鼠的血常规、肝肾功能、脑组织病理以及行为学改变等的研究,探讨芳香烃类有毒物质对脑组织的影响,为今后处理中毒群体事件提供理论支持,更能为某些苯、甲苯接触行业制定行业标准提供理论依据。
方法:
1、将健康雄性ICR小鼠56只,按照随机数字表法分成7组,每组8只。分组如下:正常对照组(皮下注射玉米油)、苯1组(150mg/kg)、苯2组(300mg/kg)、甲苯1组(500mg/kg)、甲苯2组(750mg/kg)、包头水1组(150mg/kg)、包头水2组(300mg/kg)共7组。
2、实验前测量小鼠体重,观察小鼠走独木桥的步态。根据小鼠体重对每组小鼠进行皮下注射相对应的药物,每周连续注射5天,间隔2天,连续注射3周,实验周期21天。每次注射前测量小鼠体重,每隔7天对小鼠的体重进行统计学分析比较。在实验前、实验中以及实验结束后均要观察小鼠日常表现。每7天记录小鼠走独木桥的步态评分。
3、第21天实验结束后小鼠眼球取血测定小鼠外周血常规和肝肾功能指标(白细胞计数、中性粒细胞计数、红细胞计数、血小板计数、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、尿素氮)。用SPSS统计学软件对以上数据进行统计学分析(P<0.05有统计学差异)。
4、第21天实验结束后用7%水合氯醛腹腔注射将小鼠进行麻醉,用4℃生理盐水灌注后,解剖取出脑组织,然后固定液使用预冷4℃的福尔马林溶液。再经过常规石蜡包埋切片及苏木精-伊红染色,脑组织病理改变需要使用光学显微镜观察。
结果:
1、苯组皮下注射9.38±1.408天小鼠出现兴奋不安、烦躁、易激惹,16.56±1.459天出现精神萎靡、活动减少、喜睡,部分小鼠皮肤破损,鼠尾出现出血点,走独木桥出现摇晃,5步内后腿掉落,部分小鼠在独木桥站立不走。甲苯组15.88±1.708天出现兴奋,18.56±1.825天出现精神萎靡,走独木桥出现摇晃,5步内后腿掉落。包头水组18.69±1.493天出现兴奋,但直到实验结束未进入抑制期,走独木桥出现摇晃,5步内后腿掉落。对照组小鼠行为无明显异常改变。
2、在实验过程中苯2组从第二周起体重不增,第三周体重下降,其余各组小鼠体重均有增加趋势。与对照组相比,苯1组、苯2组、甲苯1组、甲苯2组、包头水1组、包头水2组第1周(第7天)体重增加无统计学差异(p>0.05)。苯1组、苯2组、甲苯1组、甲苯2组、包头水1组、包头水2组从实验第二周(第14天)起小鼠体重增加低于对照组,且具有统计学差异(p<0.05)。苯组呈浓度依赖方式增加,且具有统计学差异(p<0.05)。
3、与对照组相比,第21天实验结束后苯2组全部小鼠和包头水2组大部分小鼠出现三系下降,且具有统计学差异(p<0.05)。苯1组白细胞计数、中性粒细胞计数下降,且具有统计学差异(p<0.05)。甲苯1组、甲苯2组、包头水2组个别出现白细胞计数、血小板计数、中性粒计数下降,但无统计学差异(p>0.05)。肝肾功能指标无明显改变,差异无统计学意义(p>0.05)。
4、与对照组相比,实验组小鼠脑组织出现大脑白质内水肿,神经组织液化坏死形成软化灶,炎性增生反应。
结论:
一定浓度的芳香烃类有毒物可以导致小鼠行为学改变,同时在组织病理学上发现其相应的炎性病变和水肿改变。
通过对小鼠皮下注射不同浓度的苯、甲苯以及包头水,来观察小鼠的血常规、肝肾功能、脑组织病理以及行为学改变等的研究,探讨芳香烃类有毒物质对脑组织的影响,为今后处理中毒群体事件提供理论支持,更能为某些苯、甲苯接触行业制定行业标准提供理论依据。
方法:
1、将健康雄性ICR小鼠56只,按照随机数字表法分成7组,每组8只。分组如下:正常对照组(皮下注射玉米油)、苯1组(150mg/kg)、苯2组(300mg/kg)、甲苯1组(500mg/kg)、甲苯2组(750mg/kg)、包头水1组(150mg/kg)、包头水2组(300mg/kg)共7组。
2、实验前测量小鼠体重,观察小鼠走独木桥的步态。根据小鼠体重对每组小鼠进行皮下注射相对应的药物,每周连续注射5天,间隔2天,连续注射3周,实验周期21天。每次注射前测量小鼠体重,每隔7天对小鼠的体重进行统计学分析比较。在实验前、实验中以及实验结束后均要观察小鼠日常表现。每7天记录小鼠走独木桥的步态评分。
3、第21天实验结束后小鼠眼球取血测定小鼠外周血常规和肝肾功能指标(白细胞计数、中性粒细胞计数、红细胞计数、血小板计数、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、尿素氮)。用SPSS统计学软件对以上数据进行统计学分析(P<0.05有统计学差异)。
4、第21天实验结束后用7%水合氯醛腹腔注射将小鼠进行麻醉,用4℃生理盐水灌注后,解剖取出脑组织,然后固定液使用预冷4℃的福尔马林溶液。再经过常规石蜡包埋切片及苏木精-伊红染色,脑组织病理改变需要使用光学显微镜观察。
结果:
1、苯组皮下注射9.38±1.408天小鼠出现兴奋不安、烦躁、易激惹,16.56±1.459天出现精神萎靡、活动减少、喜睡,部分小鼠皮肤破损,鼠尾出现出血点,走独木桥出现摇晃,5步内后腿掉落,部分小鼠在独木桥站立不走。甲苯组15.88±1.708天出现兴奋,18.56±1.825天出现精神萎靡,走独木桥出现摇晃,5步内后腿掉落。包头水组18.69±1.493天出现兴奋,但直到实验结束未进入抑制期,走独木桥出现摇晃,5步内后腿掉落。对照组小鼠行为无明显异常改变。
2、在实验过程中苯2组从第二周起体重不增,第三周体重下降,其余各组小鼠体重均有增加趋势。与对照组相比,苯1组、苯2组、甲苯1组、甲苯2组、包头水1组、包头水2组第1周(第7天)体重增加无统计学差异(p>0.05)。苯1组、苯2组、甲苯1组、甲苯2组、包头水1组、包头水2组从实验第二周(第14天)起小鼠体重增加低于对照组,且具有统计学差异(p<0.05)。苯组呈浓度依赖方式增加,且具有统计学差异(p<0.05)。
3、与对照组相比,第21天实验结束后苯2组全部小鼠和包头水2组大部分小鼠出现三系下降,且具有统计学差异(p<0.05)。苯1组白细胞计数、中性粒细胞计数下降,且具有统计学差异(p<0.05)。甲苯1组、甲苯2组、包头水2组个别出现白细胞计数、血小板计数、中性粒计数下降,但无统计学差异(p>0.05)。肝肾功能指标无明显改变,差异无统计学意义(p>0.05)。
4、与对照组相比,实验组小鼠脑组织出现大脑白质内水肿,神经组织液化坏死形成软化灶,炎性增生反应。
结论:
一定浓度的芳香烃类有毒物可以导致小鼠行为学改变,同时在组织病理学上发现其相应的炎性病变和水肿改变。