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沙门菌是一种重要的人兽共患病原菌,也是重要的食源性病原菌,可以通过污染动物源食品引起人腹泻甚至食物中毒,通常需要抗生素治疗。在中国肠炎沙门菌是食源性感染沙门菌最常见的非伤寒血清型之一。而随着抗生素的普遍使用甚至滥用,沙门菌耐药性更加复杂,多重耐药情况受到人们关注。在非伤寒沙门菌中ACSSuT(同时耐氨苄西林-氯霉素-链霉素-磺胺异恶唑-四环素)是备受关注的多重耐药表型,而作为食源性感染最常见的非伤寒沙门菌血清型之一的肠炎沙门菌,其耐药性尤其ACSSuT多重耐药的报道少见,因此有必要对肠炎沙门菌耐药性及多重耐药情况进行调查研究。本研究收集上海市2887株肠炎沙门菌,测试16种药物的纸片法药敏试验,结果显示肠炎沙门菌耐药率最高的是萘啶酸(95.29%),氨苄西林(62.22%),磺胺异恶唑(58.14%),链霉素(50.14%),对临床常用的头孢噻肟(10.20%),头孢吡肟(8.34%),头孢噻甲羧肟(7.05%),环丙沙星(3.18%),氧氟沙星(0.52%)敏感性高,对亚胺培南则表现为全部敏感。筛选出110株耐药表型为ACSSuT的肠炎沙门菌,检测20个毒力基因,结果显示Mart,siiE,pipA,sopE,spv C,spv R,pef A,prot6E,Rck,fim A,lpf D和sseI 12个毒力基因在多重耐药肠炎沙门菌中普遍存在,菌株携带毒力基因最少14个,最多19个,提示多重耐药肠炎沙门菌有高毒力高流行的潜力。以PCR方法检测了23个相关耐药基因,结果显示,各类药耐药菌株均携带着相应的耐药基因,检出率前五位的分别是:sul2(74.55%),flo(67.27%),blaCTX-M(60.00%),tet A(49.09%),aph(3)-IIa(46.36%),分别介导磺胺类,氯霉素类,头孢菌素类,四环素类,氨基糖苷类药物的耐药性。除亚胺培南外,ACSSuT菌株表现出对其他所测试药物的耐药率都有所上升的特征,尤其是对于临床常用药物头孢噻肟,头孢噻甲,头孢吡肟,耐药率分别为70.64%,48.62%,58.72%。通常产超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)菌株对常规三代四代头孢菌素类及氨曲南都耐受,本研究用双纸片确证实验显示60.9%的菌株为产ESBLS表型阳性菌株。以PCR检测(ESBLS)基因流行情况显示60%的菌株携带了CTX-M,测序显示96%的菌株为CTX-M-55。整合子的检出情况显示,5(4.54%)株菌携带了整合子基因盒,其中aadA2-dfrA12检出率最高,说明Ⅰ型整合子在多重耐药肠炎沙门菌对氨基糖苷类和磺胺类药物耐药基因的传播中起重要作用。而共同耐ACSSu T和三代头孢菌素类药物的优势耐药模式的流行并非由整合子介导,跟CTX-M-55关系密切,可能还存在其他移动元件的影响。对于治疗严重感染的药物,ACSSuT菌株对环丙沙星(9.09%VS3.18%),氧氟沙星(4.59%VS0.52%)与整体相比敏感性下降。本研究检测了介导喹诺酮耐药性的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)gyrA突变情况和5对质粒介导喹诺酮耐药基因(PMQR)携带情况,结果显示,93%的菌株存在点突变,且只存在gyrA单突变,其中87位突变所占比例超过90%,单突变主要介导了对萘啶酸的耐药性。PMQR检出率为qnr B(10.91%),aac(6′)-Ib-cr(8.18%),与QRDR单突变相比,携带PMQR同时存在QRDR gyrA单突变的菌株所引起的环丙沙星耐药率更高;而对比qnr B与aac(6′)-Ib-cr显示qnrB相比aac(6′)-Ib-cr对环丙沙星耐药性产生影响更大,能更大程度降低菌株对环丙沙星敏感性。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法研究多重耐药肠炎沙门菌同源性关系,并初步探讨耐药基因的扩散机制。PFGE分型结果表明,36株菌共享优势基因型G1,说明在多重耐药肠炎沙门菌的流行中,克隆传播作用很大。66株CTX-M阳性菌株分成24个基因型,其中26株菌PFGE图谱一致,且都携带CTX-M-55,其余菌株PFGE基因型呈现多样性的特点,说明多重耐药肠炎沙门菌中CTX-M-55的流行不仅存在散发克隆传播,还可能由质粒等可移动元件的水平转移共同造成。但关于其具体的传播机制还需要进一步探究。