作为免疫球蛋白G（Immunoglobulin G,IgG）的捕获步骤的关键技术,蛋白A色谱因结合容量低与操作成本高等问题而饱受困扰,成为了IgG纯化及单克隆抗体生产的限速步骤。因此,深化对蛋白A色谱中蛋白质吸附行为的理解并提高蛋白A色谱的结合容量是至关重要的。本文利用羧甲基葡聚糖（CM Dextran）制备聚合物接枝蛋白A色谱并在对合成色谱介质系统表征的基础上,深入考查了色谱介质孔道内的羧甲基葡聚糖接枝层对于IgG吸附行为的影响。本文的研究工作对于开发高效蛋白A色谱具有重要的指导意义。本文以浓氨水氨化环氧修饰的琼脂糖凝胶为基质,利用NHS/EDC交联法将羧甲基葡聚糖,CM Dextran T10和CM Dextran T40,接枝于基质孔道内合成羧甲基葡聚糖接枝琼脂糖色谱介质。合成过程中聚合物的接枝通过环氧基密度及所加入的羧甲基葡聚糖加以控制,其接枝量通过羧甲基葡聚糖接枝色谱介质的表征。此外,本文采用反尺寸排阻色谱测定羧甲基葡聚糖接枝色谱介质的表观孔径变化。研究结果显示,随着接枝量的增大,色谱介质介质的孔径较接枝前明显变小,这表明羧甲基葡聚糖成功接枝在琼脂糖凝胶孔道中。在此基础上,本文将发酵表达获得的蛋白A配基通过定点固定的方法偶联在羧甲基葡聚糖接枝色谱介质上。合成的羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质的表观孔径较配基偶联反应前略有增大,表明蛋白A配基的引入并不会导致接枝层坍塌。这主要归咎于偶联反应中仅有少部分的羧基基团被取代。这对于由静电作用维持的接枝层影响有限。同样地,增加流动相中离子强度也会导致羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质的表观孔径略增大。在研究工作中,本文系统地比较了CM Dextran T10和CM Dextran T40两种羧甲基葡聚糖分子对色谱介质孔道内接枝层及接枝层对羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质的吸附容量的影响。结果证明CM Dextran T10更适用于开发高容量的蛋白A色谱。较高的接枝密度需要在4FF而非6FF的基础上进行,因为4FF具有更宽阔的孔道,且在300～350 mmol/L电荷量的接枝密度内,接枝链提供3D吸附空间的正效应与空间排阻的负效应持平,具有最高容量吸附。配基密度为15 mg/g gel时的羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质Z-CMD10-4FF-IC300具有更高的饱和吸附容量96.4±2.8 mg IgG/g gel,而非接枝蛋白A色谱介质Z-CM Sepharose在配基密度为20 mg/g gel时饱和吸附容量最高达到80.7±3.7 mg IgG/g gel。配基利用率的提高证明接羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质的确能提供有效的空间吸附体积,降低配基的空间位阻。并且合成的羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质Z-CMD10-4FF-IC300的DBC比Z-CM Sepharose提高了35%,证明了优化的羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质Z-CMD10-4FF-IC300具有更高的吸附性能。本研究提供了合成羧甲基葡聚糖接枝蛋白A色谱介质的聚合物分子量、空白色谱介质、接枝密度、配基种类及密度的更好选择,为研究开发用于IgG纯化的高容量蛋白A色谱介质提供了参考。