目的:通过对昆明小鼠膝关节腔内注射不同浓度木瓜蛋白酶混合溶液及探讨中医药治疗膝骨关节炎的优势,明确关节腔内注射不同浓度木瓜蛋白酶建立小鼠膝骨关节炎模型的可行性,为建立重复性好、能大量运用于中医药实验的骨关节炎动物模型,为寻求有效的骨关节炎治疗提供实验室支持。　　方法:①健康10周龄雄性昆明小鼠80只,平均体重(45±3)g,按照随机数字表法均分为2％木瓜蛋白酶组、4％木瓜蛋白酶组、8％木瓜蛋白酶组和对照组。实验开始的第1、3、5天分组行右膝关节腔内注射2％、4％、8％(w/v)木瓜蛋白酶和0.03mol/L和L-半胱氨酸的混合溶液0.25ml/kg或等量生理盐水。②整个实验过程观察小鼠的一般情况、记录体重及右膝关节宽度、关节液白细胞计数。所有小鼠首次注射后第1周用颈椎脱臼法处死,取出关节标本制成切片、常规HE染色及甲苯胺蓝染色。镜下观察染色情况、软骨细胞、软骨基质、结构的改变并行Mankin评分。　　结果:①造模组的右膝关节均出现肿胀、屈伸功能障碍、跳步、拖步、活动减少等膝骨关节炎症状,并检测到膝关节宽度增大;②病理切片观察:造模组染色变浅、软骨层变薄、基质分解破坏等病理学改变,并随木瓜蛋白酶浓度的增高而严重程度加重,对照组无上述改变;③胫右膝骨平台Mankin评分:对照组与各造模组间Mankin评分的差异均有统计学意义(P<0.05)。各造模组间胫骨平台的 Mankin评分随木瓜蛋白酶浓度增加而增高,差异有统计学意义(P<0.05)。　　结论:昆明小鼠膝关节腔内注射2％、4％、8％(w/v)木瓜蛋白酶和0.03mol/L L-半胱氨酸混合溶液0.25ml/kg可建立不同严重程度的膝骨关节炎模型,周期短、成功率高、可用于大规模动物的实验研究。