目的:研究达沙替尼及多西他赛体内抑制三阴性乳腺癌生长的作用及机制。探讨达沙替尼是否能够替代传统化疗,或与传统化疗结合来提高晚期三阴性乳腺癌治疗效果。方法:选用人乳腺癌MDA-MB-231细胞,置于RPMI-1640培养基中,在37℃、体积分数5%CO2恒温培养箱中培养并传代。取对数生长期MB-231细胞经胰酶消化后,注射在NPG小鼠右侧背部皮下(0.2ml),6-8天形成肿瘤。将形成肿瘤的小鼠随机平均分成四组,即达沙替尼与多西他赛联合用药组、达沙替尼单药组、多西他赛单药组、无药物处理对照组。分别给予不同的药物进行治疗。测量小鼠治疗中体重及肿瘤大小变化,绘制肿瘤生长曲线及各组小鼠移植瘤的抑瘤率(Tumor inhibition rate,TIR)。各组小鼠治疗3周以后,采用颈椎脱位法将其处死,完整解剖出乳腺肿瘤组织,采用HE染色法确认组织病理后,将剩余肿瘤组织制备成单细胞悬液,采用流式细胞检测ALDEFLUOR法,测定各组小鼠肿瘤内乳腺癌干细胞的含量。后提取剩余单细胞悬液总RNA,做转录组测序,测定各样本基因表达量的定量、差异分析,GO、KEGG富集分析等。结果:1、所有药物干预组小鼠的体重均有所改变,整体来看组间对比差异不具有统计学意义(P>0.05),两两对比仅对照组和多西他赛组有明显统计学差异,(P<0.01),其他各组对比差异不具有统计学意义(P>0.05)。对四组小鼠不同时间肿瘤体积进行对比,治疗5天、10天、15天、20天四组小鼠的肿瘤体积整体对比、两两对比,差异均明显,(P<0.01),比较情况为达沙替尼+多西他赛组<达沙替尼组<多西他赛组<对照组。对比后三组小鼠抑瘤率,分别为(85.72±1.03)%、(65.36±3.58)%、(51.01 ±4.72)%,达沙替尼+多西他赛组组>达沙替尼组>多西他赛组,整体对比、两两对比均具有明显统计学意义,(P<0.01)。2、对比四组小鼠的肿瘤干细胞检出率结果显示,达沙替尼组<对照组<多西他赛组<达沙替尼+多西他赛联合用药组,除达沙替尼组与对照组之间无明显统计学差异外(P>0.05),其余各组之间对比差异明显,均具有统计学意义(P<0.01)。3、转录组测序共检测到 17,464个基因表达,其中筛选得到SAA1、TEM183B、DNER、LDLRAD2等差异显著基因相比表达上调。结论1、达沙替尼无论单药还是联合化疗的应用对于小鼠晚期三阴性乳腺癌显示出明显的抗肿瘤作用。2、达沙替尼对于抑制体内乳腺癌干细胞表现出较强的作用,联合应用多西他赛能够增加乳腺癌细胞中的肿瘤干细胞比例。