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目的：研究宫颈癌中DNMT1基因与肿瘤恶性表型以及肿瘤相关基因异常甲基化、基因表达之间的关系,进一步探讨DNMT1在宫颈癌发生发展中的功能,以及肿瘤相关基因表达调控的机制。方法：脂质体法将DNMT1-siRNA转染进入Hela、Siha细胞中,应用RT-PCR、荧光定量PCR, Western blot检测DNMT1的mRNA和蛋白质的表达变化,评价基因干扰效果。MTT、Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞的增殖、周期与凋亡变化。MeDIP-qPCR, qPCR分别检测沉默DNMT1的Hela细胞中7个肿瘤相关基因CCNA、CHFR、PAX1、SFRP4、TSLC1、PTEN、FHIT的去甲基化情况与mRNA重表达水平。结果：转染DNMT1-siRNA72h后,Hela、Siha细胞DNMT1基因的mRNA表达抑制率分别为52.54%、41.58%；Hela、Siha细胞中转染组DNMT1蛋白表达的抑制率分别为为50.31%、99.76%。MTT实验表明,转染组转染24、48、72、96h时Siha细胞存活率分别为90.45%、84.16%、71.09%、60.47%,Hela细胞存活率分别为91.47%、86.74%、78.92%、48.98%。转染48h后,Siha, Hela细胞的凋亡率达(19.4±2.90)%、(25.7±3.92)%；Siha细胞S期细胞比例由空白组(21.81±1.39)%降低到转染组的(17.54±1.84)%,Hela细胞相应的从(29.34±1.14)%降低到(17.67±1.29)%,均具有显著性差异(P<0.01)。在Hela细胞中(未经任何处理),各基因具有不同程度的甲基化,PAX1、SFRP4、TSLC1甲基化程度较高,FHIT、PTEN甲基化程度较低；各基因相对表达量亦有差异,PTEN、FHIT表达量较高,CCNA1、CHFR表达量较低。沉默DNMT1后,5个甲基化基因CCNA1、CHFR、PAX1、SFRP4、TSLC1启动子区域甲基化程度明显降低,mRNA表达量显著增加,而对PTEN、FHIT却没有影响。甲基化酶抑制剂5-aza-dC处理Hela:细胞后结果与沉默DNMT1相一致。结论：1.沉默DNMT1基因可逆转宫颈癌细胞Siha、Hela的恶性表型。2. Hela细胞中,沉默DNMT1基因能促使7个基因中的5个(CCNA1、CHFR、PAX1、SFRP4、TSLC1)启动子区域甲基化程度明显降低,基因表达量显著增加,而对PTE、FHIT却没有影响。3. CCNA1、CHFR, PAX1、SFRP4、TSLC1是通过启动子区域高甲基化实现低表达的,DNMT1是其甲基化的关键因素；而FHIT、PTEN基因通过低甲基化实现高表达的,与DNMT1没有显著关联。4. DNMT1是治疗宫颈癌的一个有效靶点。