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背景和目的:肺癌是世界范围内致死率最高的肿瘤之一,顺铂是进展期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer , NSCLC)一线化疗的基石,然而,其原发性及获得性耐药已日益成为临床NSCLC治疗的主要瓶颈。叉头框转录因子M1(FoxM1)是调控DNA复制和有丝分裂进程的重要的细胞周期转录因子,参与细胞增殖、凋亡和分化的调控,FoxM1表达上调与多种肿瘤的发生及预后显著相关。最新的研究发现FoxM1还可介导肿瘤细胞DNA损伤修复和凋亡途径,提示FoxM1可能与肿瘤多药耐药存在密切关系。本研究从组织病理和体外细胞培养两个层面,进一步论证FoxM1在NSCLC中的表达与顺铂治疗敏感性的相关性,并探讨FoxM1对NSCLC顺铂治疗敏感性的调节作用,为探索逆转NSCLC顺铂治疗敏感性提供新的理论依据。方法:(1)应用免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌组织FoxM1表达水平,观察其与患者的临床病理特征、生存时间以及顺铂治疗敏感性的关系;(2)qRT-PCR及western blot方法分别检测A549/DDP及其亲本细胞A549 FoxM1 mRNA和蛋白表达水平;(3)采用RNA干扰技术下调A549/DDP细胞株FoxM1表达,用CCK-8检测不同浓度顺铂诱导下细胞增殖活性的变化;(4)构建真核表达载体上调A549细胞株FoxM1表达,用CCK-8检测不同浓度顺铂诱导下细胞增殖活性的变化。结果:(1)FoxM1阳性表达主要定位于细胞核和细胞质,在肿瘤组织中的阳性表达率为36.76%(25/68),FoxM1在进展期肺癌中表达水平显著高于早期肺癌(P=0.001)。采用生存曲线Log-rank检验,FoxM1蛋白阳性表达组患者生存时间较阴性表达组明显缩短,差异具有统计学意义(P=0.001)。多因素分析显示FoxM1表达状态是NSCLC的独立预后指标。在接受一线含铂方案化疗的ⅢB ~Ⅳ期NSCLC患者中,顺铂治疗有效(CR+PR+SD)者FoxM1表达水平显著低于耐药(PD)者,差异具有统计学意义(P=0.002)。(2)Real time PCR测定A549/DDP FoxM1 mRNA表达水平是其亲本细胞A549的7.1倍;Western blot方法测定A549/DDP FoxM1蛋白表达水平显著高于A549。(3)RNA干扰技术下调A549/DDP细胞株FoxM1表达,细胞对顺铂的敏感性明显增加,干扰组较对照组IC50降低了76.4%(P<0.01)。(4)构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-FoxM1并转染A549细胞, FoxM1过表达导致细胞对顺铂产生耐药性,实验组较对照组IC50增加了3.13倍(P<0.01)。结论:(1)NSCLC肿瘤组织中FoxM1表达水平可能与较晚的病理学分期相关联,并与患者预后呈负相关,是NSCLC的独立预后因素;进展期NSCLC肿瘤组织中FoxM1表达水平与顺铂治疗敏感性呈负相关;(2)体外试验发现,FoxM1在A549/DDP细胞中的表达水平显著高于其亲本细胞A549;抑制FoxM1表达使细胞对顺铂的敏感性明显增加,上调FoxM1表达降低了细胞对顺铂的敏感性。