毛果算盘子多糖的结构表征及生物活性初探

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毛果算盘子(Glochidion eriocarpum Champ.)为大戟科(Euphorbiaceae)算盘子属(Glochidion)植物,别名“毛七公”、“漆大伯”。据《全国中草药汇编》中记载,具有散瘀、止血、驱风利湿、消肿止痛等功效。目前研究主要集中在小分子的分离鉴定,对毛果算盘子多糖方面的研究尚报道不多。多糖是一类具有多种生物活性的成分,可能在毛果算盘子药效方面发挥一定作用。利用超声波辅助水提醇沉法从粉碎的毛果算盘子全株中提取毛果算盘子粗多糖(SPZc),通过单因素分析和响应面法分析优化超声波辅助水提醇沉法提取SPZc的工艺条件为:料液比1:45g/mL,提取温度70℃,提取时间2.5h,超声功率300W,此条件下的最佳得率是3.87%。毛果算盘子粗多糖(SPZc)总糖含量83.3%,糖醛酸含量67.2%,蛋白质含量2.43%。SPZc经H2O2法脱色,得率75.28%。酶法和Sevage法联合脱蛋白得毛果算盘子初步纯化多糖(SPZp),得率60.48%。SPZp经DEAE-FAST-FLOW阴离子交换柱纯化,收集0.1mol/L的NaCl洗脱组分SPZ0.1a。SPZ0.1a经Superdex G-75凝胶柱进一步纯化,得到毛果算盘子多糖(SPZch)。SPZch经高效液相色谱检测得单一狭窄对称峰,说明SPZch是一个分子量均一的多糖,其分子量是 17268 Da。SPZch的结构鉴定采用气相色谱-质谱,红外光谱、部分酸水解、高碘酸氧化、smith降解、甲基化分析和核磁分析等方法。结果表明,SPZch的单糖组成为阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal),相对摩尔比为0.257:0.075:0.140:0.071:0.456,是由5种单糖组成的杂多糖;SPZch是α、β-吡喃环型多糖,SPZch的主链连接方式为→6)-β-D-Galp-(1→3)-β-D-Galp-(1→4)-β-D-Galp-(1→糖苷键,支链的连接方式为→2-β-D-Manp-1→3,6)-β-D-Galp-(1→和→3,5-α-L-Araf-(1→4,6)-β-D-Galp-(1→。端基α-L-Araf-(1→通过O-3键连接在主链上。末端为Ara、Xyl和Glc构成。对毛果算盘子多糖进行抗氧化,降血糖和神经细胞保护等方面的活性研究。结果表明,毛果算盘子多糖对·OH自由基的清除率达到70.62%,对DPPH的清除率达到76.23%,具有一定的清除作用;对α-葡萄糖苷酶的抑制率达到96.14%,可能具有体外降血糖效果;通过测定释放到培养基中的LDH的量作为检测指标,研究多糖对神经细胞损伤的保护作用。结果表明,毛果算盘子多糖对神经细胞可能具有保护作用,为毛果算盘子多糖的药用开发提供了一定的理论依据。
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