【摘 要】
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黄酮类化合物具有良好的生物活性,在生物、医药和食品保健等领域应用广泛。由于天然植物样品中复杂的基质不利于黄酮化合物的提取和检测,因此发展新型分离富集技术对纯化、富集复杂基质中的黄酮类化合物尤为重要。富集材料的性能直接关系到富集技术的好坏。聚多巴胺材料生物相容性好、环境友好且制备简单,是近年来备受关注的生物高分子材料。通过化学修饰,或者与其他功能化材料复合,可以扩展聚多巴胺材料在样品预处理技术中的更
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黄酮类化合物具有良好的生物活性,在生物、医药和食品保健等领域应用广泛。由于天然植物样品中复杂的基质不利于黄酮化合物的提取和检测,因此发展新型分离富集技术对纯化、富集复杂基质中的黄酮类化合物尤为重要。富集材料的性能直接关系到富集技术的好坏。聚多巴胺材料生物相容性好、环境友好且制备简单,是近年来备受关注的生物高分子材料。通过化学修饰,或者与其他功能化材料复合,可以扩展聚多巴胺材料在样品预处理技术中的更多应用。基于此构想,本论文设计两种磁性聚多巴胺类材料用于富集复杂样品中的黄酮类化合物。本论文的研究内容及结果主要包括以下部分:1.通过聚多巴胺和聚乙烯亚胺的包覆,成功制备了磁性氨基化修饰聚多巴胺材料(Fe3O4@PDA/PEI),制备方法简单、安全。通过傅里叶红外光谱仪(FT-IR)、X射线粉末衍射仪(XRD)、透射式电子显微镜(TEM)和热重(TG)对该材料的结构、形貌和性质进行了表征。Fe3O4@PDA/PEI材料磁性良好,包覆涂层厚度约在80 nm。制备的材料在p H值在6~7的溶液中对槲皮素吸附效果最佳。溶液的盐浓度对槲皮素的富集影响不大。采用2 m L的20%醋酸的甲醇溶液在10 min内就可将被富集的槲皮素完全洗脱,富集率可达103%,富集倍数为10。材料对槲皮素和芦丁的吸附率分别为95%和30%,对槲皮素展现出良好的选择性吸附能力。Fe3O4@PDA/PEI材料对槲皮素的吸附机理主要依靠疏水作用和氢键作用,经过计算材料对槲皮素的最大吸附容量可达42.75mg·g-1。Fe3O4@PDA/PEI材料的吸附动力学和热力学过程分别可以用准二级动力学和Freundlich模型来描述。同一材料经10次循环使用后,材料对槲皮素的富集率依然保持在95%左右,表明材料性能稳定,可再生能力强。2.基于Fe3O4@PDA/PEI材料对槲皮素良好的富集性能,建立了磁固相萃取富集结合高效液相色谱分离测定槲皮素的分析方法。槲皮素在0.008~1 mg·L-1浓度范围内,线性关系良好(R2=0.9999)。槲皮素的方法检出限经过计算为1.57μg·L-1。方法日内(n=6)和日间精密度(n=3)在2.6%~6.9%之间,方法精密度好。该分析方法在蜂蜜样品中的加标回收率在91.2%~103.7%之间,说明分析方法可靠。该方法成功在野生蜂蜜样品中检测到槲皮素,含量为0.67 mg·L-1(n=3)。3.通过键合十六胺和包覆聚左旋多巴,成功制备了磁性十六烷基和羧基修饰聚多巴胺材料(Fe3O4@C16-PDA/PL-DOPA)。通过XRD、TEM和TG对材料的结构和形貌进行了表征。Fe3O4@C16-PDA/PL-DOPA材料的聚合物涂层厚度约为160~250 nm,而且材料的磁性保持良好。以芦丁、槲皮素、木犀草素、山萘酚和高良姜素为考察对象,考察了Fe3O4@C16-PDA/PL-DOPA材料对多种黄酮类化合物的富集性能。在p H 4.0的溶液中,Fe3O4@C16-PDA/PL-DOPA材料对芦丁、槲皮素、木犀草素、山萘酚和高良姜素的富集率分别可达68%、104%、101%、99%和98%。采用1.5 m L的5%醋酸的甲醇溶液在5 min内可以将被吸附的5种黄酮类化合物完全洗脱下来。实验结果表明Fe3O4@C16-PDA/PL-DOPA材料对5种黄酮类化合物的富集机理主要基于疏水作用和氢键作用,且材料对5种目标分析物的吸附能力由强到弱依次是高良姜素>山萘酚>木犀草素>槲皮素>芦丁。4.基于Fe3O4@C16-PDA/PL-DOPA材料,建立了磁固相萃取-高效液相色谱法同时测定芦丁、槲皮素、木犀草素、山萘酚和高良姜素这5种黄酮类化合物的分析方法。在最优的富集条件下,芦丁在0.01~1 mg·L-1浓度范围内线性关系良好,而槲皮素、木犀草素、山萘酚和高良姜素均在0.003~1 mg·L-1的浓度范围内线性关系良好(R2=0.9999)。芦丁、槲皮素、木犀草素、山萘酚和高良姜素的检出限(n=9)分别为4.2、0.97、1.15、0.63和0.84μg·L-1。5种黄酮类化合物的分析日内(n=6)和日间精密度(n=3)在1.5%~4.8%之间,分析方法重现性好。所建立的分析方法在茶叶样品中的加标回收率在89.4%~112%之间,分析方法可靠。在铁观音茶水样品中能够检测到芦丁、槲皮素和木犀草素,在绿茶茶水样品中能够检测到芦丁、槲皮素和山萘酚。
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