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研究目的:研究了新型化合物含羰基钴的舒林酸衍生物对舌鳞癌细胞生物学行为的影响,并探讨其潜在机制。进一步为临床上口腔舌鳞癌的预防和治疗提供新思路和可能性。实验方法:1)体内动物实验:配置不同浓度化合物Co-SLD溶液(0,DMSO,5,10,20umol/L)分别用于处理受精后4h(4hpf)的正常斑马鱼胚胎,培育至144hpf(每24h更换培养溶液),在不同时间点记录斑马鱼的孵化率、死亡率、畸形率、心率及幼鱼的游泳距离,使用吖啶橙(AO)染色法对48hpf的斑马幼鱼体内凋亡进行检测。2)体外细胞实验:采用梯度浓度Co-SLD(0,DMSO,5,10,20umol/L)处理口腔舌鳞癌细胞CAL27,通过COX-2Elisa试剂盒检测Co-SLD作用CAL27细胞中COX-2的含量;采用生长曲线、克隆形成实验和Ki67的表达检测Co-SLD作用对CAL27细胞增殖影响;采用划痕实验检测Co-SLD对CAL27细胞迁移能力的影响;采用流式细胞术检测Co-SLD对CAL27细胞凋亡和周期的影响;并进行相关机制的探讨。结果:1)Co-SLD安全性评估:斑马鱼胚胎早期发育期间,Co-SLD在低浓度(5和10μM)时没有明显的毒性,而浓度为20uM时对斑马鱼具有显著毒性。在24hpf测定的胚胎死亡率随着Co-SLD浓度的增加而上升,浓度在20μM时胚胎死亡率大约为9.8%;在48hpf测定胚胎孵化率,Co-SLD浓度为20uM时,孵化率降低至68.3%;72hpf畸形率的增加也证明了高浓度(20μM)对斑马鱼显著的毒性。高浓度(20μM)的Co-SLD还引发心肌细胞凋亡和心率降低,并抑制幼鱼的运动行为。2)Co-SLD有效性评估:COX-2在CAL27细胞中高表达,Co-SLD作用24h后,浓度为10μM和20μM的Co-SLD作用于舌鳞癌细胞中COX-2表达明显下降,并抑制细胞增殖(与对照组相比减少39.8%),同时细胞的迁移能力也显著降低;细胞凋亡呈浓度依赖性,与对照组凋亡细胞0.63%相比,浓度为10μM或20μM时,凋亡细胞的比例高达6.96%或32.8%;细胞周期实验结果来看,阻滞主要发生在G1期,抑制DNA合成,导致细胞增殖受阻。随着化合物浓度增加,Co-SLD触发的线粒体功能障碍的特征表现为线粒体膜电位破坏,相比于对照组,10μM和20μM的Co-SLD处理组细胞的膜电位下降大约为26%和40%;同时高ROS的积累以及能量消耗,也呈浓度依赖性,并杀伤CAL27细胞。结论:Co-SLD对舌鳞癌细胞存在很好的抗癌活性,且筛选出最佳浓度为10uM,不仅避免胚胎发育毒性,还通过破坏线粒体功能来增强对癌细胞的杀伤。综上,Co-SLD在口腔舌鳞癌的治疗中具有潜在的可行性。