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随着现代先进生物技术的发展,越来越多的蛋白质及多肽类药物可以被工业化生产。针对于细胞内释放蛋白质的载体是生物医学领域的研究热点,但是载体对蛋白质药物释放效率较低,甚至还破坏蛋白质的活性,这些都是是亟待解决的科学问题。本课题通过半代聚酰胺胺(PAMAM)的端酯基与羧甲基壳聚糖(CMCS)的氨基之间的酰胺缩合反应,然后对被接枝PAMAM的端酯基进行皂化反应,成功制备了水溶性两性羧甲基壳聚糖端羧基聚酰胺胺接枝物(CMCS-PAMAM)。由于其内部的静电作用和亲疏水作用可以自组装成核壳结构的纳米粒子,并在生理pH值(pH=7.4),通过静电吸引和氢键作用对带有正电荷的溶菌酶进行有效地包覆,但是当pH值变为内涵体pH值(pH=5.1)时,纳米粒子发生电荷转变带有大量正电荷,导致纳米粒子溶胀并与溶菌酶发生静电排斥,使溶菌酶被有效地释放。实验过程中首先对CMCS,PAMAM反应原料的投料比以及参加反应PAMAM的代数对形成核壳结构的纳米粒子粒径的影响进行了研究,并分别确定了0.5G、1.5G和2.5G的PAMAM与CMCS反应的最佳原料比并提出了CMCS-PAMAM核壳结构的纳米粒子的成球机理,以最佳投料比制备而成的纳米粒子均为40-60nm,用于后期对溶菌酶的包覆。采用核磁共振表征了CMCS-PAMAM的结构。利用TEM观察了CMCS-PAMAM纳米粒子的形貌。考察了CMCS-PAMAM纳米粒子的细胞毒性,结果表明CMCS-PAMAM纳米粒子浓度低于3.16mg/ml时,几乎不显示出细胞毒性。论文还通过CMCS-PAMAM/溶菌酶聚电解质纳米粒子的ζ-电位测试以及Bradford法对载体包覆蛋白质过程进行了跟踪,并确定了适宜的载体与药物的质量比。动态光散射和TEM的实验结果表明:与CMCS相比较,CMCS-PAMAM核壳结构纳米粒子对溶菌酶的包覆效果显著提高。论文还考察了CMCS-PAMAM对溶菌酶的缓释和控释性能,缓释结果表明CMCS-PAMAM相较于CMCS可以减小溶菌酶突释。控释实验结果表明当pH由7.4降到5.1时,CMCS释放出的溶菌酶的活性大部分被抑制,不能发挥药效,而由CMCS-PAMAM释放出的溶菌酶,90%以上可以显示出活性。