羧甲基壳聚糖—聚酰胺胺核壳纳米粒子的制备及其控释蛋白质药物性能研究

来源 :天津大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:axun2010
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着现代先进生物技术的发展,越来越多的蛋白质及多肽类药物可以被工业化生产。针对于细胞内释放蛋白质的载体是生物医学领域的研究热点,但是载体对蛋白质药物释放效率较低,甚至还破坏蛋白质的活性,这些都是是亟待解决的科学问题。本课题通过半代聚酰胺胺(PAMAM)的端酯基与羧甲基壳聚糖(CMCS)的氨基之间的酰胺缩合反应,然后对被接枝PAMAM的端酯基进行皂化反应,成功制备了水溶性两性羧甲基壳聚糖端羧基聚酰胺胺接枝物(CMCS-PAMAM)。由于其内部的静电作用和亲疏水作用可以自组装成核壳结构的纳米粒子,并在生理pH值(pH=7.4),通过静电吸引和氢键作用对带有正电荷的溶菌酶进行有效地包覆,但是当pH值变为内涵体pH值(pH=5.1)时,纳米粒子发生电荷转变带有大量正电荷,导致纳米粒子溶胀并与溶菌酶发生静电排斥,使溶菌酶被有效地释放。实验过程中首先对CMCS,PAMAM反应原料的投料比以及参加反应PAMAM的代数对形成核壳结构的纳米粒子粒径的影响进行了研究,并分别确定了0.5G、1.5G和2.5G的PAMAM与CMCS反应的最佳原料比并提出了CMCS-PAMAM核壳结构的纳米粒子的成球机理,以最佳投料比制备而成的纳米粒子均为40-60nm,用于后期对溶菌酶的包覆。采用核磁共振表征了CMCS-PAMAM的结构。利用TEM观察了CMCS-PAMAM纳米粒子的形貌。考察了CMCS-PAMAM纳米粒子的细胞毒性,结果表明CMCS-PAMAM纳米粒子浓度低于3.16mg/ml时,几乎不显示出细胞毒性。论文还通过CMCS-PAMAM/溶菌酶聚电解质纳米粒子的ζ-电位测试以及Bradford法对载体包覆蛋白质过程进行了跟踪,并确定了适宜的载体与药物的质量比。动态光散射和TEM的实验结果表明:与CMCS相比较,CMCS-PAMAM核壳结构纳米粒子对溶菌酶的包覆效果显著提高。论文还考察了CMCS-PAMAM对溶菌酶的缓释和控释性能,缓释结果表明CMCS-PAMAM相较于CMCS可以减小溶菌酶突释。控释实验结果表明当pH由7.4降到5.1时,CMCS释放出的溶菌酶的活性大部分被抑制,不能发挥药效,而由CMCS-PAMAM释放出的溶菌酶,90%以上可以显示出活性。
其他文献
<正> 一、关于敦煌曲子词敦煌石窟封闭了一千年之后,于清光绪26年(公元1900)被发现,所藏唐人手写卷了中有五百多首民间流行的歌辞——曲子词。这些民间歌辟的发现是文学史上
运用文献资料法、问卷调查法、图像分析法、专家访谈法和数理统计法等综合研究方法,在理论分析、编排实践经验总结和专家论证基础上构建出艺术体操成套动作编排应用模式。应
<正>特里·伊格尔顿是当代英国著名的西方马克思主义理论批评家。他从20世纪60年代开始笔耕不辍,"其声望与等身著作,在禀笔至今的文化批评家中无人能及"。①伊格尔顿出生于英
叶尔基山辽墓是2003年全国十大考古发现之一,曾引起国内外学术界的关注。关于墓主人是谁,一真存在着不同看法。本文赞同太祖妹余庐睹姑公主说,对余庐睹姑公主的死因、丈夫、
区域因素修正是不动产估价方法之一的市场比较法评估的重要内容,也是运用市场比较法估价的难点。以市场比较法的概念、原理、特点和适用范围为基础,探讨有关区域因素修正的传
伯恩斯坦教育理论在国际学界影响极大,在国内的研究也进入起步阶段。新的教育理论的引入必然需要经过对其认知的过程。本文旨在通过对教育传递理论及其形成背景的分析,探讨在
在大量阅读文献资料的基础上运用逻辑推理等方法,试图对武术套路演练的节奏进行一定的阐述,揭示武术套路演练节奏的本质,为广大教练员和运动员提高武术套路演练的技巧以及其
<正>猴年春节已过,但觥筹交错、推杯换盏的情景仍仿佛昨天。每到新春佳节,酒是宴席上少不了的主角。"无酒不成席""桌上有酒,越喝越有",酒能助兴,更是感情的润滑剂。过去几年
<正>用一个平面去截取一个正方体,截面可能是几边形-大多数学生对于这个问题的回答是三角形和四边形。对于截面是五边形、六边形的情况,如果不借助几何模型,大部分学生是很难